Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-DCLRE1C per WB, ELISA - Q96SD1

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Proteina Artemis (DCLRE1C)

• DCLRE1C codifica per la proteina Artemis (nota anche come SNM1C, A-SCID), una nucleasi multifunzionale essenziale per la riparazione del DNA e la diversità immunitaria.
• Artemis è un componente critico della via di riparazione non omologa delle estremità (NHEJ), necessaria per riparare le rotture a doppio filamento del DNA (DSB) e per la ricombinazione V(D)J, il processo che assembla i geni delle immunoglobuline e del recettore delle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:11336668, PMID:11955432, PMID:12055248
• In isolamento, Artemis mostra attività esonucleasica 5'-3' sul DNA a singolo filamento; dopo fosforilazione e formazione del complesso con DNA-PKcs (PRKDC), acquisisce attività endonucleolitica su forcine e sporgenze 5' e 3', cruciale per aprire le estremità codificanti sigillate a forcina durante la ricombinazione V(D)J. Riferimenti correlati: PMID:11955432, PMID:15071507, PMID:15574326
• Artemis è anche necessaria per la riparazione di DSB complesse indotte dalle radiazioni ionizzanti, che richiedono un'estesa processazione delle estremità prima della ligazione tramite NHEJ. Riferimenti correlati: PMID:15456891, PMID:15468306, PMID:15574327
• Artemis si localizza prevalentemente nel nucleo, in linea con il suo ruolo nella riparazione e ricombinazione del DNA.
• Esprime ampiamente a livello di mRNA, con i livelli più alti in rene, polmone, pancreas e placenta; notevolmente, l'espressione non è elevata nei tessuti linfoidi primari come timo o midollo osseo nonostante il suo ruolo nella ricombinazione V(D)J.
• Le mutazioni in DCLRE1C sono associate a immunodeficienza combinata grave (SCID) con sensibilità alle radiazioni ionizzanti (RS-SCID), e la proteina è classificata sotto le parole chiave danno al DNA, riparazione del DNA, nucleasi e fosfoproteina.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa1–300) di DCLRE1C umano, che condivide un'elevata omologia di sequenza tra umano, topo e ratto, supportando la sua prevista reattività crociata. Per il Western blot, convalidare la specificità della banda utilizzando controlli positivi come lisati cellulari HeLa o HEK293, aspettandosi una banda a ~78 kDa.
• Per l'ELISA, considerare l'accoppiamento di questo anticorpo policlonale con un anticorpo monoclonale specifico per DCLRE1C per saggi sandwich; ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento utilizzando standard proteici ricombinanti.
• Poiché Artemis forma complessi con PRKDC, tenere presente che la proteina nativa potrebbe migrare diversamente in condizioni non riducenti; eseguire sempre marcatori di peso molecolare appropriati e includere controlli negativi.

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