Anticorpo policlonale anti-DDB1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16531

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del DDB1

• DDB1 è una proteina multifunzionale coinvolta nella riparazione del DNA come parte del complesso UV-DDB e nell'ubiquitinazione delle proteine come componente dei complessi ligasi E3 DCX (DDB1-CUL4-X-box). Riferimenti correlati: PMID:14739464 PMID:15448697 PMID:16260596
• Come componente principale del complesso UV-DDB, riconosce i danni al DNA indotti dai raggi UV (dimeri di pirimidina ciclobutanica, fotoprodotti 6-4, siti apurinici) e recluta i fattori di riparazione per escissione di nucleotidi (NER) per avviare la riparazione. Riferimenti correlati: PMID:15448697 PMID:16260596 PMID:16407242
• DDB1 funge da adattatore per multiple ligasi E3 DCX; la specificità del substrato è determinata dal DCAF associato (fattore associato a DDB1 e CUL4). Riferimenti correlati: PMID:14739464 PMID:16407252 PMID:16482215
• Il complesso DCX(DDB2) ubiquitina gli istoni H2A, H3, H4 nei siti di danni da UV, facilitandone la rimozione e promuovendo la riparazione, e ubiquitina anche XPC per potenziare il legame al DNA. Riferimenti correlati: PMID:16473935 PMID:16678110 PMID:17041588 PMID:15882621
• DCX(DTL) media la poliubiquitinazione di CDT1 e TP53, collegando DDB1 alla replicazione del DNA e alle risposte ai danni. Riferimenti correlati: PMID:17041588
• DCX(ERCC8) (il complesso CSA) funziona nella riparazione accoppiata alla trascrizione (TCR). Riferimenti correlati: PMID:12732143 PMID:32355176 PMID:38316879
• DDB1 regola l'orologio circadiano mediando la degradazione di CRY1 tramite la ligasi E3 CUL4A-DTL e influenza la gluconeogenesi epatica attraverso FOXO1. Riferimenti correlati: PMID:26431207
• Si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo; subisce acetilazione, fosforilazione e splicing alternativo; è associato a varianti patologiche e interazioni ospite-virus.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il western blot, prevedere una banda principale a circa 127 kDa; convalidare utilizzando lisati cellulari totali da linee cellulari umane, murine o di ratto.
• Per IHC-P, considerare il recupero dell'antigene indotto dal calore e testare su tessuti noti per esprimere DDB1 (es. pelle, fegato).
• Per IF/ICC, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione poiché il rilevamento dei segnali nucleari e citoplasmatici può variare.
• L'immunogeno si mappa sulla metà C-terminale del DDB1; pertanto l'anticorpo dovrebbe riconoscere tutte le isoforme a lunghezza intera ma potrebbe non rilevare le troncazioni N-terminali.

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