Anticorpo policlonale coniglio anti-DDB2 per WB, IF/ICC, ELISA - Q92466

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di DDB2

• DDB2 (proteina 2 legante il danno al DNA) è la subunità di riconoscimento del substrato del complesso UV-DDB, che rileva le lesioni al DNA indotte da UV, inclusi i dimeri di pirimidina ciclobutanica (CPD), i fotoprodotti 6-4 (6-4 PP), i siti apurinici e i brevi appaiamenti errati. Riferimenti correlati: PMID:10882109, PMID:11278856, PMID:11705987

• Come parte del complesso ligasi E3 DCX (DDB1-CUL4-X-box) DDB2-CUL4-ROC1, DDB2 dirige l'ubiquitinazione degli istoni H2A, H3 e H4 nei siti di danno, potenzialmente facilitando la loro rimozione dai nucleosomi per promuovere la riparazione. Riferimenti correlati: PMID:12732143, PMID:16473935, PMID:16678110

• La ligasi E3 contenente DDB2 ubiquitina anche la proteina XPC per potenziare il legame al DNA e la NER, e prende di mira KAT7/HBO1 per la degradazione dopo la fosforilazione mediata da ATR nella risposta al danno al DNA. Riferimenti correlati: PMID:15882621, PMID:26572825

• DDB2 si localizza prevalentemente nel nucleo ed è associata alla cromatina, riflettendo il suo diretto coinvolgimento nella sorveglianza genomica e nei processi di riparazione del DNA.

• Espressa in modo ubiquitario, DDB2 mostra i livelli più alti nell'endotelio corneale, con multiple isoforme con splicing alternativo che mostrano modelli di distribuzione tessuto-specifici.

• DDB2 è classificata sotto parole chiave tra cui riparazione del DNA, danno al DNA e via di coniugazione Ubl; le mutazioni in DDB2 sono collegate al disturbo xeroderma pigmentosum (XP) gruppo E, predisposto al cancro della pelle.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la regione N-terminale (aa 1-315) e può rilevare multiple isoforme DDB2; verificare la specificità dell'isoforma confrontando le dimensioni delle bande nel western blot.
• Per WB, è prevista una singola banda di ~48 kDa; includere controlli positivi trattati con UV per monitorare le modifiche post-traduzionali dipendenti dal danno.
• Nelle applicazioni IF/ICC, la colorazione nucleare dovrebbe essere evidente; la co-localizzazione con marcatori di danno al DNA (es., γH2AX) può confermare il reclutamento nei siti di lesione.
• Per ELISA, utilizzare l'immunogeno ricombinante come standard e valutare la reattività incrociata con lisati di topo e ratto, data la confermata reattività incrociata tra specie.
• A causa del coinvolgimento di DDB2 nelle vie di ubiquitinazione, considerare l'uso di inibitori del proteasoma o inibitori delle deubiquitinasi per stabilizzare le forme ubiquitinate in determinati impianti sperimentali.

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