Anticorpo Rabbit PolymAb® Anti-DDX3 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - O00571

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di DDX3

• Elicasi RNA ATP-dipendente con ampia specificità di substrato; può separare duplex DNA/RNA e lega strutture G-quadruplex dell'RNA.
  Riferimenti correlati: PMID:17357160, PMID:21589879, PMID:29222110, PMID:30256975

• Regola la trascrizione modulando l'espressione di CDKN1A dipendente da SP1 e reprimendo il promotore di CDH1, richiedendo attività ATPasica ma non elicasica.
  Riferimenti correlati: PMID:16818630, PMID:18264132

• Facilita la traduzione di mRNA complessi con 5’UTR strutturati; coinvolto anche nella traduzione mediata da IRES e nell'assemblaggio del ribosoma 80S.
  Riferimenti correlati: PMID:20837705, PMID:22872150, PMID:22323517, PMID:17667941, PMID:18628297

• Agisce come sensore di RNA virale nell'immunità innata, promuovendo la produzione di interferone di tipo I attraverso le vie MAVS/RIG-I e IRF3/IRF7.
  Riferimenti correlati: PMID:20127681, PMID:21170385, PMID:31575075, PMID:18583960, PMID:18636090, PMID:19913487, PMID:23478265, PMID:30341167

• Partecipa alle risposte allo stress: promuove l'assemblaggio dei granuli di stress tramite interazione con EIF4E e regola la piroptosi mediata dall'inflammasoma NLRP3.
  Riferimenti correlati: PMID:21883093

• La scissione da parte delle caspasi durante l'apoptosi inattiva DDX3X, alleviando la sua inibizione della segnalazione apoptotica estrinseca.
  Riferimenti correlati: PMID:18846110

• Attivatore allosterico della caseina chinasi CSNK1E, potenzia la fosforilazione di DVL2 e la segnalazione Wnt/β-catenina; coinvolto anche nella segregazione cromosomica mitotica.
  Riferimenti correlati: PMID:23413191, PMID:29222110, PMID:21730191

• La localizzazione subcellulare include nucleo, citoplasma, granuli di stress, inflammasomi, membrana cellulare, centrosoma e lamellipodi.

Linee Guida Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 100–200 di DDX3 umano (NP_001347.3). Questa regione N-terminale dovrebbe generare anticorpi che riconoscono tutti gli isoforme grazie all'elevata conservazione.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda di ~73 kDa; validare la specificità utilizzando lisati da knockout o knockdown di DDX3.
• Nell'immunofluorescenza, DDX3 mostra una localizzazione dinamica (nucleo, citoplasma, granuli di stress, ecc.). Utilizzare condizioni di fissazione e permeabilizzazione appropriate; considerare controlli positivi come cellule stressate per indurre la formazione di granuli di stress.
• Per l'immunoprecipitazione, l'anticorpo è validato; assicurarsi la compatibilità con il tampone di lisi e includere controlli appropriati.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; determinare sperimentalmente le concentrazioni ottimali di rivestimento.

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