Anticorpo monoclonale coniglio anti-DDX3X/DDX3Y per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - O00571/O15523

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di DDX3X/DDX3Y

• DDX3X è un'elicasi RNA ATP-dipendente multifunzionale che svolge il filamento di RNA e DNA a doppia elica, con attività ATPasica stimolata da vari acidi nucleici. Si lega a strutture G-quadruplex dell'RNA ed è coinvolta nella trascrizione, traduzione e immunità innata. Riferimenti correlati: PMID:17357160, PMID:21589879, PMID:31575075, PMID:29222110, PMID:30256975
• DDX3X regola positivamente la trascrizione di CDKN1A/WAF1/CIP1 tramite SP1 e reprime CDH1/E-caderina, modulando anche l'espressione di MTTP mediata da HNF4A nell'omeostasi lipidica. Riferimenti correlati: PMID:16818630, PMID:18264132, PMID:28128295
• Promuove la traduzione di mRNA complessi con UTR 5' strutturati, come la ciclina E1, e migliora l'assemblaggio del ribosoma 80S indipendentemente dall'attività ATPasica. Riferimenti correlati: PMID:20837705, PMID:22872150, PMID:17667941, PMID:18628297, PMID:22323517
• Come sensore di RNA virale, DDX3X innesca la produzione di interferoni di tipo I tramite le vie MAVS/RIG-I e TLR7/TLR8, attivando IRF3/IRF7 e NF-κB. Questo anticorpo riconosce sia DDX3X che il suo omologo cromosomico Y DDX3Y (O15523), che condividono un'alta identità di sequenza nella regione immunogena. Riferimenti correlati: PMID:20127681, PMID:21170385, PMID:31575075, PMID:33674311, PMID:18583960, PMID:18636090, PMID:19913487, PMID:23478265, PMID:27736973
• DDX3X è richiesta per l'assemblaggio dei granuli di stress tramite l'interazione con EIF4E, promuovendo la sopravvivenza, e regola anche l'assemblaggio dell'infiammasoma NLRP3, influenzando la piroptosi. Riferimenti correlati: PMID:21883093
• Attiva allostericamente la caseina chinasi CSNK1E, migliorando la fosforilazione di DVL2 e regolando positivamente la segnalazione Wnt/β-catenina. Riferimenti correlati: PMID:23413191, PMID:29222110
• DDX3X facilita la replicazione di diversi virus, inclusi HCV, HIV-1, Zika, Dengue e VEEV, spesso interagendo con componenti virali o modulando l'immunità innata. Riferimenti correlati: PMID:29899501, PMID:21170385, PMID:15507209, PMID:18583960, PMID:21589879
• Localizzato nel nucleo, citoplasma, granuli di stress, centrosomi e lamellipodi; ampiamente espresso con alti livelli nei testicoli, nell'epidermide e nel fegato. Riferimenti correlati: PMID:15294876, PMID:16301996, PMID:16818630

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 100–200) prende di mira una regione conservata di DDX3X e DDX3Y; questo anticorpo monoclonale è previsto per rilevare entrambi i paraloghi nei campioni umani, di topo e di ratto.
• Nel Western blotting, DDX3X migra intorno a 73 kDa, DDX3Y intorno a 71 kDa e un potenziale isoforma alternativa a 32 kDa; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e verificare nel sistema di campione pertinente.
• Per l'immunoprecipitazione, il formato monoclonale coniglio fornisce tipicamente un'alta specificità; ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo e le condizioni di incubazione per il proprio impianto sperimentale.
• In IHC-P e IF/ICC, ci si aspetta una colorazione nucleare e citoplasmatica; l'induzione dello stress può causare una rilocazione nei granuli di stress. Validare con marcatori di compartimento appropriati e controlli.
• Le applicazioni ELISA possono essere considerate per quantificare DDX3X/DDX3Y in lisati o preparazioni ricombinanti; può essere esplorato un formato sandwich con coppie di anticorpi abbinati.

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