Anticorpo policlonale di coniglio anti-DDX4 per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q9NQI0

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di DDX4

• DDX4, noto anche come VASA, è un membro della famiglia delle elicasi dell'RNA DEAD-box e svolge probabilmente la funzione di elicasi dell'RNA ATP-dipendente.
• È essenziale per la spermatogenesi e svolge un ruolo fondamentale nello sviluppo e nella differenziazione delle cellule germinali (PubMed:10920202, PubMed:21034600).
  Riferimenti correlati: PMID:10920202, PMID:21034600
• DDX4 è coinvolto nel silenziamento dei trasposoni attraverso la via dei piRNA, contribuendo a mantenere l'integrità genomica nelle cellule germinali (per analogia).
• Partecipa alla biogenesi dei piRNA secondari, inclusa la produzione di piRNA innescata da PIWIL2, utilizzando la propria attività elicasica per elaborare i pre-piRNA (per analogia).
• La proteina si localizza nel citoplasma e nella regione perinucleare.
• L'espressione è altamente specifica per i tessuti: è presente esclusivamente nell'ovaio e nel testicolo, nonché nelle cellule germinali primordiali migratorie.
• DDX4 è regolato dalla fosforilazione ed è soggetto a splicing alternativo.
• Appartiene a un'ampia gamma di processi biologici, tra cui lo sviluppo cellulare, la differenziazione, la meiosi e il silenziamento genico mediato dall'RNA.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un frammento ricombinante comprendente gli amminoacidi 635–724 all'estremità C-terminale di DDX4 umano. È probabile che questa regione sia conservata e che possa rilevare più isoforme.
• Per il Western blot, si prevede una banda di circa 79 kDa. Validare utilizzando controlli positivi appropriati derivati da lisati di testicolo o ovaio e specie pertinenti (uomo, topo, ratto).
• Per l'immunofluorescenza (IF-P) e l'immunoistochimica (IHC-P), si prevede una colorazione citoplasmatica e perinucleare. Utilizzare fissazione e permeabilizzazione appropriate e considerare il recupero antigenico per IHC-P.
• È stata dimostrata la reattività crociata con topo e ratto, consentendo l'uso in questi organismi modello. Ottimizzare le diluizioni dell'anticorpo e le condizioni per ciascuna applicazione e specie.
• A causa dell'espressione limitata nelle cellule germinali, garantire la specificità tissutale durante lo sviluppo del test.
• Questo anticorpo policlonale può essere adatto alla rilevazione basata su ELISA, ma le prestazioni devono essere validate nel formato sandwich o indiretto desiderato.

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