Anticorpo policlonale anti-DDX46 per WB, IHC-P, ELISA - Q7L014

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di DDX46

• DDX46 (proteina 46 della scatola DEAD, nota anche come PRP5/PRPF5) è una probabile elicasi RNA dipendente da ATP e un membro della famiglia delle proteine DEAD-box, caratterizzata da motivi conservati coinvolti nel legame dell'ATP e nell'apertura dell'RNA. Riferimenti correlati: PMID:12234937, PMID:32494006, PMID:34822310
• È un componente fondamentale del complesso ribonucleoproteico nucleare piccolo (snRNP) U2 17S dello spliceosoma, la macromolecola grande che rimuove gli introni dai pre-mRNA. Riferimenti correlati: PMID:12234937, PMID:32494006, PMID:34822310
• All'interno dello snRNP U2 17S, DDX46 partecipa direttamente all'assemblaggio precoce dello spliceosoma e media il riconoscimento del sito di diramazione dell'introne, promuovendo la selezione dell'adenosina del sito di diramazione che funge da nucleofilo per il primo passo catalitico dello splicing. Riferimenti correlati: PMID:32494006, PMID:34822310
• DDX46 è essenziale per l'assemblaggio del pre-spliceosoma e per la verifica del sito di diramazione, garantendo uno splicing accurato ed efficiente. Riferimenti correlati: PMID:34822310
• Studi sulla localizzazione subcellulare indicano che DDX46 è presente negli speckles nucleari, nel nucleoplasma e nei corpi di Cajal, coerentemente con il suo ruolo nella lavorazione del pre-mRNA e nella dinamica dello spliceosoma.
• Le modifiche post-traduzionali di DDX46 includono acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, come suggerito dai dati di proteomica ad alto throughput.
• La proteina ha un peso molecolare calcolato di circa 117 kDa e contiene un dominio di legame dell'ATP, un nucleo di elicasi e una regione a coda a elica C-terminale, che probabilmente media le interazioni proteina-proteina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Poiché l'immunogeno copre la regione C-terminale (aa 682–1031), l'anticorpo potrebbe rilevare la DDX46 a lunghezza intera e possibili varianti tronche prive di questa regione. Considerare la verifica della reattività nel proprio sistema di campione specifico.
• DDX46 ha un peso molecolare previsto di ~117 kDa. Per il Western blotting, utilizzare una percentuale di gel appropriata (es. gel Tris-glicina o Bis-Tris al 6–8%) e ottimizzare le condizioni di trasferimento per le proteine ad alto peso molecolare.
• Per l'immunoistochimica, la localizzazione nucleare di DDX46 suggerisce che i metodi di permeabilizzazione e recupero dell'antigene potrebbero essere critici. Validare la colorazione nei controlli tissutali pertinenti e considerare una controcolorazione nucleare.
• L'anticorpo è stato validato per campioni umani, di topo e di ratto. L'allineamento delle sequenze degli ortologi DDX46 può aiutare a prevedere la reattività con altre specie e guidare la progettazione sperimentale interspecie.

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