Anticorpo policlonale anti-DENND4A per WB ed ELISA - Q7Z401

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di DENND4A

• DENND4A, noto anche come proteina legante il promotore di C-myc (MYCPBP) e IRLB, è una proteina contenente un dominio DENN che agisce come fattore di scambio dei nucleotidi della guanina (GEF) e regolatore trascrizionale.
• Può attivare RAB10 promuovendo lo scambio di GDP con GTP, convertendo così le proteine Rab inattive legate al GDP nella loro forma attiva legata al GTP.
• Si lega all'elemento simile all'ISRE (elemento di risposta stimolato dall'interferone) del promotore P2 di MYC, regolando potenzialmente l'espressione di MYC. Riferimenti correlati: PMID:8056341
• La localizzazione subcellulare è principalmente nucleare, in linea con il suo ruolo nella regolazione trascrizionale.
• È espresso ubiquitariamente, con i livelli più elevati nel midollo osseo, livelli intermedi nei linfociti del sangue periferico e i livelli più bassi nella milza. Nei tessuti cerebrali, mammari e prostatici, l'espressione è maggiore nelle cellule normali rispetto alle cellule tumorali.
• L'espressione è regolata in modo dipendente dalla crescita e dal ciclo cellulare, suggerendo un coinvolgimento nel controllo della proliferazione.
• La proteina è soggetta a splicing alternativo e fosforilazione, aggiungendo ulteriori livelli di regolazione funzionale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, il peso molecolare previsto di DENND4A è di circa 209 kDa. Si consiglia di utilizzare un gel SDS-PAGE a bassa percentuale (ad es. 6-8%) e un tempo di trasferimento sufficiente per garantire un trasferimento efficiente delle proteine ad alto peso molecolare.
• Essendo un anticorpo policlonale, è necessario convalidare la consistenza tra diversi lotti. Includere controlli positivi e negativi appropriati negli esperimenti per confermarne la specificità.
• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1500-1650 di DENND4A umano (NP_005839.3). Per gli esperimenti su campioni murini, verificare l'omologia della sequenza nella regione target.
• Per le applicazioni ELISA, le concentrazioni ottimali di rivestimento e le condizioni di rilevazione devono essere determinate empiricamente.
• Data la localizzazione nucleare di DENND4A, si consiglia di utilizzare lisati arricchiti in componenti nucleari per migliorare il rilevamento nel WB.

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