Anticorpo Policlonale Anti-Desmoplachina per WB, IHC-P, ELISA - P15924

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Desmoplachina

• La Desmoplachina (nomi alternativi DP, DCWHKTA) è un componente principale delle giunzioni cellula-cellula dei desmosomi, obbligatoria in tutti i desmosomi, e regola positivamente l'adesione cellulare (PubMed:25733715). Riferimenti correlati: PMID:25733715
• Ancora i filamenti intermedi alla placca desmosomiale e organizza la rete di cheratina, essenziale per l'integrità della barriera epiteliale epidermica e dermica (PubMed:26604139). Riferimenti correlati: PMID:26604139
• La Desmoplachina promuove la comunicazione intracellulare tramite giunzioni gap facilitando il trasporto mediato dai microtubuli di GJA1/CX43 alle membrane cellulari tramite interazione con MAPRE1/EB1 (PubMed:25225338). Riferimenti correlati: PMID:25225338
• La proteina regola negativamente la progressione del ciclo cellulare e la differenziazione nei cheratinociti, potenzialmente inibendo le vie MAPK e PI3K (PubMed:17475244). Riferimenti correlati: PMID:17475244
• La Desmoplachina interagisce con il complesso segnaletico COP9, promuovendo la differenziazione dei cheratinociti attraverso la deneddilazione di EGFR e la ridotta localizzazione di membrana (PubMed:28891468). Riferimenti correlati: PMID:28891468
• È necessaria per mantenere l'abbondanza proteica di molteplici componenti dei desmosomi, inclusi DSG1, DSG2, DSC2, DSC3 e le plakofilline (PubMed:17475244, PubMed:26073755). Riferimenti correlati: PMID:17475244 PMID:26073755
• Il dominio C-terminale lega il DNA telomerico e interagisce con TRF2 per prevenire danni ai telomeri e mantenere la lunghezza dei telomeri (PubMed:31595153). Riferimenti correlati: PMID:31595153
• La Desmoplachina è espressa in tessuti di origine stratificata, inclusi cheratinociti della pelle, mucosa orale, cuore e muscolo erettore del pelo, e si localizza nei desmosomi, membrana cellulare, citoplasma e nucleo.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 2609-2830) della Desmoplachina umana, che contiene un dominio di ripetizione plakin coinvolto nel legame con i filamenti intermedi e nell'interazione con il DNA telomerico. Gli anticorpi diretti contro questa regione possono riconoscere la Desmoplachina a lunghezza intera e eventuali frammenti C-terminali.
• Per il Western blot, prevedere una banda vicino al peso molecolare previsto di ~332 kDa. Data la grande dimensione, considerare l'uso di gel SDS-PAGE al 6-8% e trasferimento umido con tempi di trasferimento prolungati (es., durante la notte a 30 V). Validare la specificità della banda utilizzando controlli appropriati.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), sono consigliati il recupero dell'antigene (es., buffer citrato, pH 6.0) e la permeabilizzazione del tessuto. Testare su tessuti ricchi di desmosomi come pelle o cuore e confermare la localizzazione alle giunzioni cellula-cellula.
• Per l'ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato per rilevare proteina Desmoplachina ricombinante o purificata. Ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento in base al formato dell'antigene.
• La reattività incrociata riportata con le specie umana, di topo e di ratto dovrebbe essere confermata sperimentalmente nel proprio specifico sistema di saggio, poiché l'omologia di sequenza può influenzare il legame.
• Data la localizzazione subcellulare dinamica della Desmoplachina (desmosomi, citoplasma, nucleo), considerare la frazionamento subcellulare o la colorazione multipla con marcatori giunzionali per verificare la specificità dell'anticorpo.

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