Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-DGCR8 per WB, ELISA - Q8WYQ5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di DGCR8

• Codificato dal gene DGCR8 (C22orf12, DGCRK6) sul cromosoma 22, DGCR8 è la subunità legante l'RNA del complesso microprocessore essenziale per il processamento dei miRNA primari.
• DGCR8 funziona come ancoraggio molecolare che riconosce la giunzione dsRNA-ssRNA dei pri-miRNA e indirizza DROSHA a tagliare precisamente a 11 bp di distanza, generando le forcelle pre-miRNA.
  Riferimenti correlati:
  PMID:15531877 PMID:15574589 PMID:15589161 PMID:26027739 PMID:26748718
• Il legame dell'eme a DGCR8 promuove la dimerizzazione e la formazione di un trimero cooperativo che aumenta l'attività di taglio del pri-miRNA, mentre il monomero privo di eme mostra un'attività inferiore.
• DGCR8 riconosce specificamente le modifiche N6-metiladenosina (m6A) nei pri-miRNA, un determinante critico per un processamento efficiente.
  Riferimenti correlati:
  PMID:25799998
• Oltre alla biogenesi dei miRNA, DGCR8 partecipa alla riparazione delle rotture doppie del DNA facilitando il reclutamento di RNF168 nei foci di danno del DNA.
  Riferimenti correlati:
  PMID:34188037
• DGCR8 è localizzato principalmente nel nucleo e nel nucleolo, in coerenza con i suoi ruoli nel processamento dell'RNA e nella stabilità del genoma.
• La proteina è espressa ubiquitariamente e soggetta a modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione, formazione di legami isopeptidici e coniugazione ubiquitina-simile.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Durante l'esecuzione del Western blot, è prevista una banda intorno a 86 kDa; convalidare la specificità utilizzando il knockdown mediato da siRNA o lisati con sovraespressione di DGCR8.
• Per ELISA, l'immunogeno (amminoacidi 436-764) può essere utilizzato come controllo positivo; considerare di ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento nella matrice di campione pertinente.
• Verificare la reattività crociata nei sistemi umano e murino come indicato; per altre specie, eseguire test empirici a causa della conservazione della sequenza.
• Poiché DGCR8 partecipa a complessi proteici dinamici, per applicazioni basate sull'immunoprecipitazione possono essere necessarie condizioni native o di denaturazione mite per preservare l'accessibilità dell'epitopo.
• L'anticorpo può essere adatto anche per immunoistochimica o immunofluorescenza dopo convalida; considerare metodi di recupero dell'antigene appropriati per proteine nucleari.

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