Anticorpo policlonale anti-DHTKD1 di coniglio per WB e ELISA - Q96HY7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del DHTKD1

• DHTKD1 codifica per la subunità E1a del complesso 2-ossoglutarato deidrogenasi (OADHC), un enzima mitocondriale che catalizza la decarbossilazione limitante del tasso del 2-ossoglutarato (alfa-chetoglutarato) in glutaril-CoA e CO2. Riferimenti correlati: PMID:29191460, PMID:29752936, PMID:32303640, PMID:32695416

• Questa reazione è essenziale per la fase finale del catabolismo della L-lisina, L-idrossilisina e L-triptofano, collegando la degradazione degli aminoacidi al metabolismo energetico mitocondriale.

• In vitro, DHTKD1 può anche decarbossilare il 2-ossoglutarato, sebbene con un'efficienza significativamente inferiore rispetto al suo substrato preferito 2-ossoglutarato, dimostrando la specificità del substrato all'interno della famiglia delle deidrogenasi 2-ossoacido. Riferimenti correlati: PMID:29191460, PMID:29752936, PMID:32633484

• La proteina risiede nella matrice mitocondriale e richiede il pirofosfato di tiamina (ThDP) come cofattore per la sua attività catalitica.

• Le mutazioni in DHTKD1 sono associate alla malattia di Charcot-Marie-Tooth di tipo 2Q (CMT2Q) e all'acido alfa-aminoadipico e alfa-chetoadipico aciduria (AMOXAD), sottolineando la sua importanza clinica nella neurodegenerazione e nei disturbi metabolici.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il western blotting, il peso molecolare previsto è di 103 kDa; si consiglia di utilizzare un gel SDS-PAGE al 7,5-10% per una risoluzione ottimale di questa proteina relativamente grande.
• Dato che l'anticorpo è policlonale e prodotto contro un frammento ricombinante (aa 1-280), può riconoscere più epitopi; validare la specificità utilizzando lisati cellulari con sovraespressione o knockdown/knockout.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con umano, topo e ratto, come indicato dai dati del fornitore; si consiglia di validare nelle specie pertinenti utilizzando appropriati tessuti o lisati cellulari.
• Per le applicazioni ELISA, si raccomanda la titolazione dell'anticorpo e l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento per ottenere rapporti segnale/rumore ottimali.
• Si consiglia di utilizzare protocolli di arricchimento mitocondriale durante l'analisi di campioni a bassa abbondanza, poiché DHTKD1 è una proteina mitocondriale.

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