Anticorpo monoclonale di coniglio anti-DHX9/RNA Helicase A per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q08211

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di DHX9

• DHX9, noto anche come RNA Helicase A, è un'elicasi degli acidi nucleici multifunzionale ATP-dipendente che svolge sia il DNA sia l'RNA in direzione 3' verso 5', partecipando alla replicazione del DNA, alla trascrizione, all'elaborazione dell'RNA, alla traduzione e al silenziamento genico. Riferimenti correlati: PMID:11416126, PMID:12711669, PMID:15355351

• DHX9 svolge diversi substrati di acidi nucleici, tra cui dsDNA, dsRNA, ibridi DNA:RNA, D-loop, R-loop, quadruplex G e DNA triplex, richiedendo una coda a singolo filamento in posizione 3' per l'avvio. Riferimenti correlati: PMID:20669935, PMID:21561811, PMID:24049074

• In quanto membro della famiglia delle elicasi box DEAH, DHX9 agisce come coattivatore trascrizionale, collegando l'RNA polimerasi II e fattori di trascrizione quali BRCA1, CREBBP, RELA e SMN1, e si lega al promotore di CDKN2A. Riferimenti correlati: PMID:11038348, PMID:11149922, PMID:11416126

• Nella regolazione post-trascrizionale, DHX9 promuove lo splicing alternativo, stabilizza l'mRNA di MYC tramite il complesso CRD e potenzia la traduzione di specifici mRNA attraverso il legame alla 5' UTR. Riferimenti correlati: PMID:11402034, PMID:16680162, PMID:28221134, PMID:19029303, PMID:22190748

• DHX9 si localizza prevalentemente nel nucleo (nucleoplasma, nucleolo), ma può anche spostarsi nel citoplasma e associarsi al citoscheletro e al centrosoma in condizioni specifiche.

• Le modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, modulano l'attività e le interazioni di DHX9.

• Nelle infezioni virali, DHX9 agisce come sensore citosolico degli acidi nucleici virali e potenzia la trascrizione, lo splicing e la traduzione di HIV-1 legandosi all'RNA TAR e ad altri elementi virali. Riferimenti correlati: PMID:20696886, PMID:21957149, PMID:11096080, PMID:9892698, PMID:25149208

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente alla regione C-terminale (aa 1100–1200) di DHX9 umano; verificare che l'anticorpo riconosca il DHX9 endogeno al peso molecolare atteso di circa 141 kDa nel proprio sistema di campionamento.
• Per il Western blot, a causa dell'elevato peso molecolare di DHX9, utilizzare un gel di acrilammide a bassa percentuale (ad es. 6–8%) e assicurare condizioni di trasferimento adeguate; includere controlli di caricamento appropriati.
• È stato riportato che questo anticorpo reagisce con DHX9 umano, murino e di ratto; tuttavia, i livelli di espressione variano tra tessuti e linee cellulari, pertanto è necessario ottimizzare la preparazione dei campioni e la diluizione dell'anticorpo per ciascuna applicazione.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), si raccomanda il recupero antigenico indotto dal calore in tampone citrato (pH 6,0) e l'utilizzo di un sistema di rilevazione sensibile; convalidare la specificità della colorazione mediante controlli appropriati.
• L'anticorpo è adatto per l'immunoprecipitazione (IP) e l'ELISA; considerare l'utilizzo del peptide immunogeno come controllo positivo e convalidare le prestazioni dell'anticorpo nel proprio specifico assetto sperimentale.

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