Anticorpo policlonale anti-DKC1 per IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60832

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di DKC1

• DKC1 codifica per la discherina, la subunità catalitica del complesso ribonucleoproteico nucleolare piccolo (snoRNP) H/ACA, responsabile della pseudouridilazione dell'rRNA. Isomerizza l'uridina in modo che il ribosio si leghi al C5 anziché all'N1, introducendo residui di pseudouridina che stabilizzano la conformazione dell'rRNA. Riferimenti correlati: PMID:25219674 PMID:32554502
• Essenziale per la biogenesi dei ribosomi e, attraverso il corretto processamento e il traffico intranucleare di TERC (la componente RNA della telomerasi), è necessario per il mantenimento dei telomeri. Riferimenti correlati: PMID:19179534
• Promuove inoltre l'adesione cellula-cellula e cellula-substrato, aumenta il tasso di proliferazione cellulare e induce l'iperespressione della citocheratina.
• Si localizza prevalentemente nel nucleolo e nei corpi di Cajal all'interno del nucleo, con una certa presenza nel citoplasma.
• Espresso ubiquitariamente nei tessuti umani, riflettendo il suo ruolo di "housekeeping" nella modifica dell'rRNA.
• Soggetto a varie modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e coniugazione di tipo ubiquitinico, che possono regolarne l'attività o la stabilità.
• Le varianti genetiche di DKC1 sono associate alla discheratosi congenita legata all'X, caratterizzata da insufficienza midollare, predisposizione al cancro e caratteristiche come distrofia ungueale e leucoplachia orale; le mutazioni possono anche causare la sindrome di Hoyeraal-Hreidarsson.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 245–514 della DKC1 umana (NP_001354.1), coprendo la regione centrale fino a quella C-terminale. Considerare questa sequenza durante la progettazione di reagenti di rilevamento complementari o la mappatura degli epitopi.
• Per l'IHC-P, poiché la DKC1 è espressa ubiquitariamente ma arricchita nei nucleoli, ottimizzare il recupero dell'antigene e validare la colorazione in tessuti di controllo positivo come testicoli o linee cellulari in proliferazione. Includere controlli negativi (es. campioni privi di DKC1) per confermare la specificità.
• Le applicazioni IF/ICC dovrebbero rivelare la localizzazione nucleolare e nei corpi di Cajal. Utilizzare metodi di fissazione/permeabilizzazione appropriati e co-colorare con un marcatore nucleolare (es. fibrillarina) per verificare il pattern atteso.
• L'ELISA potrebbe richiedere un'attenta ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e di rilevamento a causa delle dimensioni relativamente grandi della proteina. La reattività crociata con gli ortologhi di topo e ratto dovrebbe essere verificata sperimentalmente se si utilizzano campioni di queste specie.

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