Anticorpo policlonale di coniglio anti-DKK3 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9UBP4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione della Dickkopf-related protein 3

• La Dickkopf-related protein 3 (DKK3), codificata dal gene DKK3 (noto anche come REIC), è un membro della famiglia dickkopf di antagonisti secreti di Wnt.
• La DKK3 antagonizza la segnalazione canonica di Wnt inibendo l'interazione tra i co-recettori LRP5/6 e i ligandi Wnt, e promuove inoltre l'internalizzazione di LRP5/6 attraverso la formazione di complessi con KREMEN.
• Durante lo sviluppo dei vertebrati, la DKK3 inibisce localmente i processi regolati da Wnt, tra cui il patterning assiale antero-posteriore, lo sviluppo degli arti, la somitogenesi e la formazione degli occhi.
• Negli adulti, la DKK3 è implicata nella formazione ossea, nelle malattie ossee, nel cancro e nella malattia di Alzheimer.
• La DKK3 è una proteina secreta, dotata di un peptide segnale, ed è modificata post-traduzionalmente mediante glicosilazione e formazione di ponti disolfuro; contiene inoltre un dominio coiled-coil.
• La proteina mostra la massima espressione nel cuore, nel cervello e nel midollo spinale.
• Come proteina del proteoma di riferimento, la DKK3 è stata identificata in studi di proteomica e nel sequenziamento proteico diretto.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blotting, la proteina ha un peso molecolare previsto di circa 38 kDa, ma la glicosilazione può causare uno spostamento; validare con controlli appropriati.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, poiché la DKK3 è secreta, si consiglia di utilizzare inibitori della secrezione o di colorare in condizioni che mantengano la proteina legata alla matrice extracellulare; validare nei tipi cellulari rilevanti.
• Quando si utilizza questo anticorpo per ELISA, l'immunogeno copre la regione N-terminale (aa 22-200), che potrebbe riconoscere la DKK3 anche in complesso con altre proteine; eseguire l'ottimizzazione del sandwich ELISA.
• Grazie alla reattività crociata con topo e ratto, questo anticorpo è adatto per studi su organismi modello; tuttavia, verificare l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno prima dell'uso.
• I dati sulla specificità tissutale suggeriscono un'elevata espressione nel cuore, nel cervello e nel midollo spinale; questi tessuti sono raccomandati come controlli positivi.

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