Anticorpo monoclonale coniglio anti-DLAT per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P10515

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di DLAT

• DLAT codifica per la componente diidrolipoamide acetiltransferasi (E2) del complesso piruvato deidrogenasi (PDH) mitocondriale, che catalizza la conversione del piruvato in acetil-CoA, collegando la glicolisi e il ciclo TCA (probabile).
• Il complesso PDH contiene più copie di tre enzimi: E1 (piruvato deidrogenasi), E2 (diidrolipoamide acetiltransferasi) e E3 (diidrolipoamide deidrogenasi). DLAT costituisce il nucleo E2, accetta gruppi acetili dalla porzione lipoile di E1 e li trasferisce al coenzima A per formare acetil-CoA (probabile).
• Gli alias noti per DLAT includono PDC-E2, PDCE2, DLTA, E2 e PBC: quest'ultimo riflette la sua identificazione come principale autoantigene nella cirrosi biliare primitiva (subunità da 70 kDa del complesso antigenico M2).
• Subcellularmente, DLAT si localizza nella matrice mitocondriale, come indicato dall'annotazione di LOCALIZZAZIONE SUBCELLULARE e dalla presenza di un peptide di transito mitocondriale.
• Modifiche post-traduzionali come acetilazione, lipoilazione e fosforilazione sono riportate nelle parole chiave di UniProt, evidenziando la regolazione complessa del complesso PDH.
• L'identificazione proteomica e lo stato di proteoma di riferimento confermano la rilevazione affidabile di DLAT negli studi proteomici, coerente con il suo ruolo di enzima metabolico chiave.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 87-270, che include il dominio di legame del lipoile; pertanto, questo anticorpo è in grado di rilevare sia DLAT nativa che ricombinante. Per WB, la dimensione della banda attesa è di circa 69 kDa; l'uso di campioni arricchiti di mitocondri può migliorare la specificità del segnale.
• In IF/ICC, si prevede una colorazione mitocondriale; si consiglia la co-localizzazione con marcatori di organelli (es. MitoTracker) per la convalida.
• L'anticorpo ha reattività crociata con topo e ratto; verificare l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno se la rilevazione specie-specifica è fondamentale.
• Per IHC-P, considerare il recupero antigenico e l'ottimizzazione della diluizione. Utilizzare tessuti di controllo positivo che esprimono alti livelli di DLAT (es. fegato, cuore) per confermare la reattività.
• Per ELISA, assicurarsi che la proteina ricombinante o l'antigene peptidico corrisponda alla sequenza dell'immunogeno per evitare la mascheratura dell'epitopo.

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