Anticorpo policlonale Anti-DLC1 per WB e ELISA - Q96QB1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di DLC1

• DLC1 è una proteina GTPasi-activante per Rho (RhoGAP) che inattiva specificamente le piccole GTPasi RHOA, RHOB, RHOC e CDC42, terminando così le loro cascate di segnalazione a valle.
• Svolge un ruolo critico nella riorganizzazione del citoscheletro, nella migrazione cellulare e nella proliferazione, ed è riconosciuto come un soppressore tumorale in diversi tipi di cancro.
• Oltre alla sua attività RhoGAP, DLC1 funziona come attivatore della fosfolipasi PLCD1.
• Durante la migrazione delle cellule epiteliali indotta da fattori di crescita, DLC1 forma complessi con TNS3 e PTEN; dopo la stimolazione, la fosforilazione innesca un cambio in cui PTEN lega DLC1 e TNS3 lega p85, portando all'attivazione di RHOA nella parte posteriore della cellula e di RAC1 nel bordo di avanzamento. Riferimenti correlati: PMID:26166433
• DLC1 si localizza nel citoplasma, nelle adesioni focali e nella membrana cellulare, coerentemente con il suo ruolo nell'adesione e nella migrazione cellulare.
• La proteina è espressa al livello più alto nella milza, con livelli più bassi in prostata, testicolo, ovaio, intestino tenue e colon; è assente nel timo.
• DLC1 contiene un dominio START (StAR-related lipid transfer), come riflesso nel suo nome alternativo STARD12, che può mediare interazioni con lipidi o steroli.
• Il gene subisce splicing alternativo e utilizza promotori alternativi, generando molteplici varianti di trascritto.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 204–463, una regione a monte del caratteristico dominio RhoGAP; questo progetto può fornire specificità per le isoforme di DLC1 senza interferire con la rilevazione dell'attività GAP.
• Per il Western blotting, questo anticorpo rileva una banda intorno al peso molecolare previsto di 171 kDa; considerare di includere controlli positivi da lisati cellulari di uomo, topo o ratto noti per esprimere DLC1 (ad esempio linee derivate dalla milza) data la reattività incrociata riportata.
• Nelle applicazioni ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento dell'antigene utilizzando DLC1 full-length ricombinante o il frammento immunogeno e verificare la linearità della rilevazione con diluizioni seriali della proteina standard.
• Poiché DLC1 funziona nelle adesioni focali e nella migrazione, le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per l'immunocitochimica devono essere accuratamente ottimizzate per preservare la localizzazione nativa; si noti che questo anticorpo non è stato convalidato per ICC/IHC nelle specifiche del prodotto.

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