Anticorpo policlonale Anti-DNA-PKcs per WB, IHC-P, ELISA - P78527

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della DNA-PKcs

• Serina/treonina-protein chinasi che agisce da sensore molecolare per il danno al DNA, essenziale per l'unione non omologa delle estremità (NHEJ) richiesta per la riparazione delle rotture a doppio filamento (DSB) e la ricombinazione V(D)J. L'attività catalitica richiede il legame con il DNA. Riferimenti correlati: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805
• Reclutata da XRCC5/XRCC6 alle estremità del DNA, protegge e allinea le estremità rotte, previene la degradazione e sequestra la DSB per la riparazione tramite NHEJ. Agisce come scaffold per la localizzazione delle proteine di riparazione del DNA. Riferimenti correlati: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805
• Fosforila substrati chiave nella risposta al danno del DNA, tra cui H2AX ('Ser-139'), p53/TP53, c-Abl/ABL1 e artemis (DCLRE1C), modulandone le funzioni. Riferimenti correlati: PMID:14627815, PMID:16046194, PMID:10026262, PMID:10467406, PMID:11889123
• Coinvolto nella modulazione della trascrizione e nella biogenesi dei ribosomi: favorisce la processazione dell'rRNA precursore in rRNA 18S maturo all'interno del processoma della subunità piccola legandosi all'snoRNA U3. Riferimenti correlati: PMID:32103174
• Contribuisce alla regolazione del ritmo circadiano antagonizzando la fosforilazione di CRY1 e aumentando la stabilità della proteina CRY1, probabilmente tramite un meccanismo indiretto. (Per similarità)
• Regola la risposta immunitaria innata tramite la via cGAS-STING: si assembla nel complesso HDP-RNP e fosforila CGAS, impedendone l'oligomerizzazione. Riferimenti correlati: PMID:28712728, PMID:33273464
• Si localizza principalmente nel nucleo, nel nucleolo e nel citosol. Trovata alle estremità dei cromosomi, suggerisce un ruolo nel mantenimento dei telomeri.
• Parole chiave: danno al DNA, riparazione del DNA, legame al DNA, Chinasi, Serina/treonina-protein chinasi, Nucleo, immunità innata, variante patologica (IMD26).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione C-terminale (a.a. 3993-4128) della DNA-PKcs umana; verificare il riconoscimento della proteina full-length nei sistemi di campioni rilevanti.
• Per il Western blot, a causa dell'elevato peso molecolare (469 kDa), si consiglia di utilizzare gel di SDS-PAGE a bassa percentuale (es. 6% o gradiente) e tempi di trasferimento prolungati. Confermare la specificità con controlli adeguati.
• Per l'immunistochimica (IHC-P), ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene (es. tampone citrate pH 6.0 o Tris-EDTA pH 9.0) e testare più concentrazioni per ridurre il fondo.
• Nelle applicazioni ELISA, convalidare la reattività dell'anticorpo con l'immunogeno o la proteina nativa in diverse condizioni di rivestimento.
• La reattività incrociata è riportata per l'uomo; se necessario, testare la reattività con altre specie, poiché potrebbe esistere omologia di sequenza.

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