Monoclonal Antibodies
Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-DNA-PKcs per WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P78527
Numero articolo : CM0003774
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- Applicazione
- WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA
- Reattività Crociata
- Umano
- Peso Proteico
- 469 kDa
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Specifiche e Parametri Principali del Prodotto
| Parametro | Valore |
|---|---|
| Nome Prodotto | DNA-PKcs Rabbit mAb |
| Note/Alias | HYRC; p350; DNAPK; DNPK1; HYRC1; IMD26; XRCC7; DNAPKc; DNA-PKC; DNA-PKcs |
| Specie | Umano |
| GeneID (Umano) | 5591 |
| GeneID | 5591 |
| Immunogeno | Proteina Ricombinante|Proteina di fusione ricombinante contenente una sequenza corrispondente agli amminoacidi 3993-4128 del DNA-PKcs umano (NP_008835.5). |
| Fonte | Coniglio |
| Categoria | Anticorpi Monoclonali |
| Applicazione | WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA |
| Reattività Incrociata | Umano |
| SWISS | P78527 |
| Peso Proteico | 469 kDa |
| Spedizione | Borsa del ghiaccio |
Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del DNA-PKcs
- Il DNA-PKcs (sottounità catalitica della chinasi proteica dipendente dal DNA), indicato anche come DNPK1, p460, HYRC o XRCC7, è codificato dal gene PRKDC (ID Gene: 5591) e funge da sottounità catalitica del complesso DNA-PK.
- Come chinasi proteica serina/treonina, agisce come sensore molecolare del danno al DNA ed è essenziale per il giunzione di estremità non omologa (NHEJ), la via principale per la riparazione delle rotture a doppia elica (DSB) e la ricombinazione V(D)J. Il legame al DNA è richiesto per la sua attività catalitica e viene reclutato da XRCC5/Ku80 e XRCC6/Ku70 alle estremità del DNA, dove protegge, allinea e isola le estremità rotte per prevenire il degrado (PubMed:11955432, PubMed:12649176, PubMed:14734805). Riferimenti correlati: PMID:11955432 PMID:12649176 PMID:14734805
- Il DNA-PKcs fosforila numerosi substrati sul motivo consenso [ST]-Q, inclusa l'istona H2AX in 'Ser-139' per regolare la risposta al danno al DNA (PubMed:14627815, PubMed:16046194), p53/TP53, XRCC4, XRCC5, XRCC6 e AKT1 in 'Ser-473' per promuovere la segnalazione di sopravvivenza cellulare (PubMed:10026262, PubMed:10467406, PubMed:11889123, PubMed:15262962). Riferimenti correlati: PMID:14627815 PMID:16046194 PMID:10026262 PMID:10467406 PMID:11889123 PMID:15262962
- Oltre alla riparazione dei DSB, il DNA-PKcs contribuisce alla manutenzione dei telomeri e previene la fusione delle estremità cromosomiche (Per analogia).
- Modula anche la trascrizione (PubMed:11955432, PubMed:12649176, PubMed:14734805) e promuove l'assemblaggio precoce dei ribosomi elaborando l'rRNA precursore in rRNA 18S maturo nel processoma della subunità piccola, interagendo con U3 snoRNA (PubMed:32103174). Riferimenti correlati: PMID:11955432 PMID:12649176 PMID:14734805 PMID:32103174
- Nell'immunità innata, il DNA-PKcs regola la via cGAS-STING fosforilando CGAS e PARP1, ed è parte del complesso HDP-RNP che attiva IRF3 (PubMed:28712728, PubMed:33273464, PubMed:35460603). Riferimenti correlati: PMID:28712728 PMID:33273464 PMID:35460603
- La proteina è localizzata prevalentemente nel nucleo e nel nucleolo, con una certa presenza nel citosol, ed è soggetta a molteplici modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione.
Guida Sperimentale e Consigli Tecnici
- L'immunogeno comprende gli amminoacidi 3993–4128 del DNA-PKcs umano, una regione C-terminale; considerare questa posizione dell'epitopo quando si accoppia con altri anticorpi o si disegnano strategie di rilevamento.
- Per il Western blotting, il bersaglio ha un peso molecolare previsto di 469 kDa; assicurarsi di utilizzare una percentuale adeguata di gel (es. poliacrilamide al 6%) e tempi di trasferimento prolungati per facilitare un blotting efficiente.
- Sebbene validato per più applicazioni, le diluizioni ottimali dovrebbero essere determinate empiricamente nel sistema sperimentale dell'utente finale, partendo dagli intervalli di concentrazione raccomandati nei protocolli standard.
- La reattività incrociata è riportata per campioni umani; per tessuti o linee cellulari non umane, eseguire un allineamento della sequenza cross-specie prima dell'uso e validare con controlli appropriati.
- Dato che il DNA-PKcs è una proteina nucleare, regolare i passaggi di fissazione e permeabilizzazione per l'immunofluorescenza o l'immunoistochimica per garantire una corretta accessibilità dell'antigene.
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Scheda Tecnica del Prodotto
Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-DNA-PKcs per WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P78527
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