Anticorpo policlonale di coniglio Anti-DNA-PKcs per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P78527

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di DNA-PKcs (subunità catalitica della protein chinasi dipendente dal DNA)

• DNA-PKcs è la subunità catalitica del complesso protein chinasi dipendente dal DNA (DNA-PK), codificata dal gene PRKDC (conosciuto anche come HYRC, HYRC1, DNPK1, p460).
• Come sensore molecolare del danno al DNA, DNA-PKcs è essenziale per la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), la via principale che ripara le rotture a doppio filamento (DSB) e la ricombinazione V(D)J. Riferimenti correlati: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805
• DNA-PKcs richiede il legame al DNA per l'attivazione catalitica; viene reclutato alle estremità del DNA dall'eterodimero Ku70/Ku80 (XRCC6/XRCC5) per proteggere e allineare le estremità del DNA rotto e isolare la rottura per la NHEJ. Riferimenti correlati: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805
• Oltre alla riparazione del DNA, DNA-PKcs agisce come proteina scaffold, modulando la trascrizione, promuovendo l'assemblaggio dei ribosomi processando l'rRNA precursore e mantenendo la stabilità telomerica. Riferimenti correlati: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805, PMID:32103174
• DNA-PKcs è localizzato principalmente nel nucleo e nel nucleolo, ed è presente anche nel citosol.
• Come serina/treonina chinasi che riconosce la sequenza consenso [ST]-Q, DNA-PKcs fosforila substrati chiave tra cui H2AX (Ser-139) per la segnalazione del danno al DNA, AKT (Ser-473) per la regolazione della via PI3K/AKT e numerosi fattori di riparazione del DNA (ad esempio XRCC4, XRCC5, XRCC6). Riferimenti correlati: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805, PMID:14627815, PMID:16046194, PMID:15262962

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 3987-4086 di DNA-PKcs umano; è prevista reattività vicino alla regione C-terminale della proteina.
• Per Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 469 kDa; si consiglia l'uso di gel gradiente SDS-PAGE a bassa percentuale e tempi di trasferimento prolungati per garantire un blottaggio efficiente di questa proteina di grandi dimensioni.
• Per immunistochimica (IHC-P) e immunofluorescenza (IF/ICC), si raccomanda la convalida dei metodi di recupero dell'antigene e delle condizioni di fissazione nei campioni di tessuto o cellulari pertinenti.
• Come anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere confermata dal fornitore; includere sempre controlli positivi e negativi appropriati nel proprio sistema sperimentale.

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