Anticorpo policlonale coniglio anti-DNA Polimerasi beta per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P06746

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della DNA Polimerasi beta

• La DNA polimerasi beta (POLB), nota anche come 5'-deossiribosio-fosfato liasi (5'-dRP liasi) o AP liasi, è una polimerasi di riparazione che svolge un ruolo chiave nella riparazione per escissione di basi (BER). Questa via corregge le basi danneggiate e la POLB è essenziale per il passo di sintesi di riparazione. Riferimenti correlati: PMID:10556592, PMID:9207062, PMID:9572863
• Seguendo l'escissione della base e l'incisione della catena da parte di una endonucleasi AP, la POLB rimuove il gruppo 5'-deossiribosio-fosfato dal sito AP pre-inciso tramite la sua attività 5'-dRP liasi. Quindi riempie il gap a singolo nucleoide attraverso la sua attività di DNA polimerasi. Riferimenti correlati: PMID:10556592, PMID:17526740, PMID:8841119
• La POLB mostra anche attività AP liasi, clivando i legami zucchero-fosfato 3' a un sito abasico (AP) intatto, contribuendo così a vie di riparazione alternative. Riferimenti correlati: PMID:9614142
• L'attività polimerasica della POLB è distributiva piuttosto che processiva, aggiungendo un nucleotide alla volta in modo graduale, il che la distingue dalle DNA polimerasi replicative.
• La POLB si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, coerente con i suoi ruoli nella riparazione del DNA nucleare e possibili funzioni citoplasmatiche.
• Le modifiche post-traduzionali della POLB includono acetilazione, metilazione e coniugazione con ubiquitina, che possono regolare la sua stabilità, attività o interazione con altre proteine BER.
• La POLB è un componente chiave della risposta cellulare ai danni al DNA, contribuendo alla stabilità del genoma e svolgendo ruoli in processi come la replicazione e la riparazione del DNA.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre l'intera proteina POLB umana (amminoacidi 1–335), il che può indurre anticorpi contro più epitopi. Considerare questa ampia reattività nell'interpretazione dei risultati.
• Per il Western blot, è prevista una banda specifica intorno a 38 kDa. Validare con appropriati controlli positivi e negativi e considerare l'uso di lisati convalidati KO per confermare la specificità.
• Questo anticorpo è adatto per IHC-P, IF/ICC ed ELISA. Ottimizzare sperimentalmente le diluizioni e le condizioni di recupero dell'antigene per ogni applicazione e tipo di campione.
• È riportata la reattività crociata con la POLB murina, consentendo studi su modelli murini. Tuttavia, verificare la reattività crociata nel proprio specifico sistema sperimentale.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere monitorata. Includere standard di riferimento interni per confronti quantitativi tra esperimenti.

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