Anticorpo policlonale coniglio anti-DNAJA1 [Validato KO] per WB, IF/ICC, ELISA - P31689

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di DNAJA1

• DNAJA1, noto anche come HDJ2 o proteina 4 da shock termico 40 kDa, è un membro della famiglia di chaperone DnaJ/Hsp40. Funziona come co-chaperone per HSPA8/Hsc70, stimolando la sua attività di idrolisi dell'ATP (PubMed:10816573). Riferimenti correlati: PMID:10816573
• Nel suo ruolo di co-chaperone, DNAJA1 è coinvolto nel trasporto proteico nei mitocondri e assiste nel ripiegamento e nella translocazione delle proteine mitocondriali.
• DNAJA1 regola negativamente la translocazione della proteina pro-apoptotica BAX dal citosolai mitocondri, proteggendo le cellule dall'apoptosi in condizioni di stress (PubMed:14752510). Riferimenti correlati: PMID:14752510
• Al contrario, DNAJA1 può anche promuovere l'apoptosi in risposta a stress cellulari specifici, come l'esposizione all'anisomicina o alle radiazioni UV, evidenziando il suo duplice ruolo nelle decisioni sul destino cellulare (PubMed:24512202). Riferimenti correlati: PMID:24512202
• DNAJA1 si localizza in più compartimenti subcellulari, tra cui il citoplasma, il nucleo, i mitocondri, il reticolo endoplasmatico (microsomi) e la membrana, coerente con le sue diverse funzioni di chaperone.
• La proteina subisce varie modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione e prenilazione, e contiene domini a dito di zinco conservati che mediano le interazioni con le proteine client.
• L'isoforma 2 di DNAJA1, generata per splicing alternativo, mostra un'espressione tessuto-specifica con livelli elevati nel testicolo e nel polmone, mentre l'isoforma 1 è espressa ubiquitariamente.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno era una proteina di fusione ricombinante che comprendeva gli amminoacidi 178–397 di DNAJA1 umano (NP_001530.1). Questa regione include il dominio C-terminale e può contribuire al riconoscimento di entrambe le isoforme; si consiglia la validazione nei sistemi di campione pertinenti.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare osservato è di circa 45 kDa. Utilizzare controlli appropriati, inclusa la validazione knockout se possibile, per confermare la specificità.
• Nelle applicazioni di immunofluorescenza (IF/ICC) ed ELISA, ottimizzare la diluzione dell'anticorpo e le condizioni di fissazione/permeabilizzazione in base alla localizzazione subcellulare del bersaglio (citoplasmatica, nucleare, mitocondriale).
• Poiché l'espressione di DNAJA1 può cambiare in condizioni di stress, considerare l'utilizzo di campioni di controllo positivo trattati con shock termico o anisomicina per verificare la reattività.

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