Anticorpo Policlonale Anti-DNMT1 Coniglio per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P26358

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di DNMT1

• DNMT1, nota anche come DNA metiltransferasi HsaI, MCMT o CXXC9, è una proteina nucleare di ~183 kDa che funge da principale DNA metiltransferasi di mantenimento nell'uomo.
• Metila preferenzialmente dinucleotidi CpG emimetilati e si associa ai foci di replicazione del DNA durante la fase S per copiare fedelmente i pattern di metilazione sul filamento neo-sintetizzato, garantendo l'eredità epigenetica. Riferimenti correlati: PMID:17200670, PMID:21745816, PMID:26070743
• Durante le fasi G2 e M, DNMT1 rimane associata alla cromatina per sostenere la metilazione indipendentemente dalla replicazione, preservando così i segni di metilazione genomica lungo tutto il ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:21745816
• DNMT1 media anche la repressione trascrizionale legando direttamente HDAC2 e può coordinare la metilazione del DNA con modificazioni degli istoni, come la dimetilazione di H3K9, in concerto con DNMT3B e CTCFL. Riferimenti correlati: PMID:10888872, PMID:18413740
• Forma un complesso corepressore che facilita l'ipermetilazione guidata da KRAS e il silenziamento dei geni oncosoppressori nel cancro del colon-retto, e similmente mantiene la repressione dei geni dello sviluppo nelle cellule staminali embrionali. Riferimenti correlati: PMID:24623306
• Espressa ubiquitariamente con i livelli più alti nei tessuti fetali, cuore, rene e placenta; l'isoforma 2 è meno abbondante. Si localizza nel nucleo e sui cromosomi, e contiene caratteristici domini zinc-finger CXXC (Parole chiave: splicing alternativo, zinc-finger).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un frammento N-terminale (aa 1-124) di DNMT1; pertanto, è previsto che riconosca la DNMT1 a lunghezza intera e possibilmente prodotti di troncamento N-terminale.
• Quando si esegue il western blot, utilizzare un gel SDS-PAGE al 6-8% e assicurare un trasferimento efficiente a causa delle grandi dimensioni di DNMT1 (~183 kDa).
• Per l'immunoistochimica e l'immunofluorescenza, potrebbe essere necessaria la permeabilizzazione nucleare; considerare di validare la specificità della colorazione con controlli di knockdown o knockout di DNMT1.
• L'anticorpo reagisce in modo incrociato con DNMT1 di topo e ratto, ma gli utenti dovrebbero verificarne le prestazioni in ciascuna specie e tipo di tessuto data l'espressione ubiquitaria ma variabile.
• Essendo un anticorpo policlonale, può presentare variabilità tra i lotti; includere un controllo di caricamento e standard di riferimento interni per saggi quantitativi.

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