Anticorpo policlonale coniglio anti-DNMT3A per WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6K1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di DNMT3A

• DNMT3A è una DNA (citosina-5)-metiltransferasi essenziale per la metilazione de novo del DNA, responsabile della definizione dei pattern di metilazione durante lo sviluppo e coordina le modificazioni degli istoni (PubMed:12138111, PubMed:16357870, PubMed:30478443).
  Riferimenti correlati: PMID:12138111, PMID:16357870, PMID:30478443
• Modifica il DNA in modo non processivo e metila siti non CpG, con una preferenza per le regioni linker del DNA tra nucleosomi; la sua attività è inibita dall'istone H1 (per similarità).
• DNMT3A svolge un ruolo critico nell'imprinting paterno e materno ed è richiesto per la metilazione della maggior parte dei loci imprintati nelle cellule germinali (per similarità).
• Agisce come corepressore trascrizionale per ZBTB18, viene reclutato sulla trimmetilazione della 'Lisina-36' dell'istone H3 (H3K36me3) e può reprimere la trascrizione mediante il reclutamento dell'attività HDAC (per similarità).
• La proteina si localizza principalmente nel nucleo e sui cromosomi, ma è rilevabile anche nel citoplasma (UniProt Q9Y6K1).
• È altamente espressa nei tessuti fetali, nel muscolo scheletrico, nel cuore, nelle cellule mononucleate del sangue periferico e nel rene, con livelli più bassi nella placenta, nel cervello, nel fegato, nel colon, nella milza, nell'intestino tenue e nel polmone (UniProt Q9Y6K1).
• L'uso di promotori alternativi e lo splicing producono isoforme come DNMT3A2 (TBRS, HESJAS), che aggiungono diversità funzionale (UniProt Q9Y6K1).

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare un protocollo di estrazione nucleare per arricchire il segnale di DNMT3A; è attesa una banda intorno ai 102 kDa. Validare la specificità dell'anticorpo con campioni trattati con knockout di DNMT3A o siRNA.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), si prevede una colorazione prevalentemente nucleare, con possibile segnale citoplasmatico in alcuni tipi cellulari; utilizzare metodi appropriati di fissazione e permeabilizzazione.
• Nelle applicazioni ELISA, titrare l'anticorpo contro la proteina ricombinante DNMT3A o l'antigene peptidico per ottimizzare le concentrazioni di lavoro.
• Quando si valuta la reattività crociata tra uomo, topo e ratto, confermare l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno per garantire una rilevazione accurata.

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