Anticorpo policlonale Anti-DNMT3B per WB, IHC-P, ELISA - Q9UBC3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di DNMT3B

• DNMT3B (DNA (cytosina-5)-metiltransferasi 3B) è un enzima chiave richiesto per la metilazione de novo del DNA su tutto il genoma, essenziale per definire i pattern di metilazione durante lo sviluppo iniziale.
• Metila preferenzialmente il DNA nucleosomiale all'interno della regione centrale e può funzionare come co-repressore trascrizionale interagendo con CBX4 e ZHX1, indipendentemente dalla sua attività metiltransferasica.
• In un complesso con DNMT1 e il fattore di trascrizione CTCFL/BORIS, DNMT3B attiva l'espressione del gene BAG1 modulando la dimetilazione dell'istone H3 alle posizioni K4 e K9.
• Necessario per il silenziamento di DUX4 nelle cellule somatiche (PubMed:27153398). Riferimenti correlati: PMID:27153398
• Lo splicing alternativo genera diverse isoforme; le isoforme 4 e 5 mancano dei motivi critici della metiltransferasi e sono probabilmente non funzionali.
• DNMT3B è esclusivamente nucleare ed è espresso ubiquitariamente, con i livelli più alti nel fegato fetale, cuore, rene e placenta. L'isoforma 1 è assente nel cervello, muscolo scheletrico e PBMC, mentre l'isoforma 5 è specifica del testicolo.
• La proteina contiene domini a dita di zinco, subisce fosforilazione e citrullinazione e svolge ruoli nel silenziamento genico e nello sviluppo di patologie (ad esempio, la sindrome ICF).

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'anticorpo è stato prodotto contro una proteina ricombinante corrispondente alla regione N-terminale (aa 1-100) di DNMT3B umano. Questa regione è presente nella maggior parte delle isoforme; si consiglia comunque di confermare la rilevazione di tutte le varianti attese nel vostro campione.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è ~96 kDa. Per una rilevazione ottimale utilizzare estratti nucleari o lisati cellulari totali da tessuti con elevata espressione di DNMT3B (ad esempio, fegato fetale o placenta).
• Questo anticorpo presenta reattività crociata con topo e ratto; validare sempre le prestazioni nella specie e nell'applicazione di interesse.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), si consiglia di testare sezioni di tessuto fetale dove DNMT3B è abbondante. Le condizioni di recupero dell'antigene potrebbero richiedere ottimizzazione.
• Le applicazioni ELISA devono includere controlli negativi e positivi adeguati per garantire la specificità.

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