Anticorpo policlonale coniglio anti-DNMT3L per WB, IHC-P, ELISA - Q9UJW3

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del DNMT3L

• Il DNMT3L è un fattore regolatorio cataliticamente inattivo delle DNA metiltransferasi che può promuovere o inibire la metilazione del DNA a seconda del contesto.
• Essenziale per la funzione di DNMT3A e DNMT3B: attiva DNMT3A e DNMT3B legandosi al loro dominio catalitico (PubMed:17687327). Riferimenti correlati: PMID:17687327
• Accelera il legame del DNA e dell'S-adenosil-L-metionina (AdoMet) alle metiltransferasi e si dissocia dal complesso dopo il legame del DNA (PubMed:17687327). Riferimenti correlati: PMID:17687327
• Il DNMT3L riconosce la lisina 4 dell'istone H3 non metilata (H3K4me0) e induce la metilazione de novo del DNA tramite il reclutamento o l'attivazione di DNMT3 (PubMed:17687327). Riferimenti correlati: PMID:17687327
• Nelle cellule germinali, il DNMT3L è richiesto per la metilazione dei loci imprintati insieme al DNMT3A e, nelle cellule germinali maschili, metila specificamente i retrotrasposoni per prevenirne la mobilizzazione.
• Nelle cellule staminali embrionali, il DNMT3L promuove sia la metilazione del DNA dei geni housekeeping che inibisce la metilazione ai promotori dei geni bivalenti interagendo con il componente EZH2 del complesso PRC2/EED-EZH2, impedendo il reclutamento di DNMT3A/B.
• Il DNMT3L promuove la differenziazione delle ESC in cellule germinali primordiali inibendo la metilazione del DNA al promotore di RHOX5, attivandone così l'espressione.
• A livello subcellulare, il DNMT3L si localizza prevalentemente nel nucleo, in linea con il suo ruolo nella modifica della cromatina.
• Viene espresso a bassi livelli in diversi tessuti tra cui testicolo, ovaio e timo, e appartiene alla famiglia delle proteine a dito di zinco, caratterizzata da motivi di legame dei metalli.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Valutare l'esecuzione di una frazionazione nucleare per arricchire il DNMT3L per il rilevamento in Western blot, poiché si localizza nel nucleo.
• Per IHC-P, potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene; validare in tessuti con nota bassa espressione come il testicolo o l'ovaio.
• La sequenza immunogenica è conservata tra umano, mouse e ratto; la reattività incrociata è prevista ma deve essere confermata sperimentalmente.
• L'anticorpo rileva una banda intorno a 44 kDa; si consiglia una scala proteica pre-colorata per una stima accurata della dimensione.
• Il blocco peptidico con l'immunogeno può servire come controllo di specificità sia per gli saggi WB che IHC-P.

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