Anticorpo policlonale coniglio anti-DOG-1/TMEM16A per WB, ELISA - Q5XXA6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di DOG-1/TMEM16A

• ANO1 codifica per anoctamin-1, un canale del cloro attivato dal calcio (CaCC) che svolge ruoli centrali nel trasporto anionico transepiteliale e nella contrazione del muscolo liscio. Riferimenti correlati: PMID:20056604, PMID:22178883, PMID:22946059
• Il canale è indispensabile per l'attività pacemaker delle cellule interstiziali di Cajal (ICCs) nel tratto gastrointestinale, governando così la motilità intestinale.
• Nelle cellule epiteliali delle vie aeree, ANO1 contribuisce in modo sostanziale alla conduttanza del cloro basale e stimolata ed è critico per lo sviluppo della cartilagine tracheale.
• Facilita l'attivazione e l'espressione di membrana del CFTR migliorando il rilascio dei depositi di Ca²⁺ del reticolo endoplasmatico, sottolineando il suo ruolo nel trasporto del cloro correlato alla fibrosi cistica. Riferimenti correlati: PMID:28963502
• ANO1 regola l'espressione del muco delle vie aeree indotta dalle interleuchine IL3 e IL8 tramite la proteina associata all'asma CLCA1, upregolando MUC5AC; tuttavia, prove contrastanti indicano che l'espressione di MUC5AC potrebbe non richiedere ANO1 in determinati contesti. Riferimenti correlati: PMID:33026825, PMID:31732694
• Lo splicing alternativo genera isoforme con sensibilità al calcio e permeabilità al cloro distinte, inclusa una variante epiteliale delle ghiandole sudoripare con aumentata permeabilità basale al Cl⁻ e una isoforma ipersensibile.
• La proteina si localizza prevalentemente alla membrana plasmatica apicale e ai comparti presinaptici, con un'espressione tissutale ampia che comprende fegato, muscolo scheletrico, muscolo liscio gastrointestinale, dotti collettori del rene, epitelio nasale e ghiandole sudoripare eccrine.
• Le modifiche post-traduzionali, come glicosilazione, formazione di ponti disolfuro e fosforilazione, sono critiche per il traffico e la regolazione funzionale di anoctamin-1.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il western blotting, prevedere una banda a circa 114 kDa in condizioni riducenti e denaturanti; convalidare utilizzando lisati di controllo positivo da tessuti umani o murini noti per esprimere ANO1, come il muscolo liscio gastrointestinale o l'epitelio delle vie aeree.
• L'immunogeno (aa 40–210) corrisponde alla regione N-terminale; il rilevamento di determinate isoforme di splicing può variare, quindi verificare il riconoscimento specifico dell'isoforma se necessario.
• Quando si esegue l'ELISA, titolare l'anticorpo per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali e confermare la specificità contro la proteina ANO1 ricombinante o lisati cellulari con sovraespressione.
• Essendo un anticorpo policlonale, è possibile una variabilità lotto-per-lotto; includere controlli appropriati e considerare l'assorbimento incrociato se si osservano bande non specifiche.
• La reattività crociata è verificata per umano e mouse; per altre specie, eseguire l'allineamento della sequenza della regione immunogenica e test pilota.

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