Anticorpo policlonale coniglio anti-Dopamina beta-idrossilasi (DBH) per WB, ELISA - P09172

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto Biologico: Funzione DBH e Localizzazione

• DBH (Dopamina beta-idrossilasi) è una monoossigenasi contenente rame che catalizza la conversione della dopamina in noradrenalina, un passaggio chiave nella biosintesi delle catecolamine.
• È nota anche come dopamina beta-monoossigenasi e appartiene alla famiglia delle monoossigenasi dipendenti da ascorbato di tipo II del rame.
• L'enzima richiede la vitamina C (ascorbato) come cofattore e ossigeno molecolare per la sua attività catalitica.
• DBH è localizzata principalmente all'interno di vescicole secretorie, inclusi i granuli cromaffini del midollo surrenale e le grandi vescicole a nucleo denso nei neuroni, dove si trova sia in forma solubile che associata alla membrana.
• La proteina è una glicoproteina con legami disolfuro e un'elica transmembrana singola, indicante il suo ancoraggio alla membrana vescicolare.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione e contiene diversi siti di legame del rame essenziali per la funzione enzimatica.
• DBH è rilevabile nel siero e nel liquido cerebrospinale a causa della sua secrezione dalle cellule neuroendocrine, e la sua attività è spesso utilizzata come marcatore della funzione del sistema nervoso simpatico.
• Il gene DBH umano codifica per una proteina di 69kDa (calcolata) ed è altamente espresso nei neuroni adrenergici e nel midollo surrenale.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• Per il Western blotting, considerare di testare una gamma di diluizioni dell'anticorpo (es. 1:500–1:2000) per ottimizzare il segnale. L'immunogeno è derivato dalla regione N-terminale (aa1-200), quindi prestare attenzione all'accessibilità dell'epitopo se si utilizzano condizioni denaturanti rispetto a quelle non denaturanti.
• Validare la reattività dell'anticorpo nei tessuti umani, del topo e del ratto rilevanti, poiché è prevista una reattività crociata basata sull'omologia di sequenza nella regione immunogenica.
• Per ELISA, può essere impiegato il rivestimento diretto dell'antigene peptidico o della proteina DBH ricombinante. Eseguire un esperimento pilota per determinare la concentrazione ottimale di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo.

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