Anticorpo policlonale anti-trasportatore della dopamina/SLC6A3 per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q01959

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del trasportatore della dopamina/SLC6A3

• Il trasportatore della dopamina sodio-dipendente (DAT), codificato dal gene SLC6A3 (DAT1), è responsabile della terminazione della neurotrasmissione dopaminergica mediando la ricaptazione della dopamina, dipendente da sodio e cloruro, dalla fessura sinaptica (PubMed:10375632, PubMed:11093780, PubMed:1406597). Riferimenti correlati: PMID:10375632 PMID:11093780 PMID:1406597
• Oltre alla dopamina, DAT trasporta anche la noradrenalina con dipendenze ioniche simili, contribuendo alla regolazione della segnalazione delle catecolamine (per similarità).
• DAT è localizzato prevalentemente nella membrana cellulare dei neuroni, in particolare nelle proiezioni neuronali, negli assoni e nelle varicosità assonali delle terminazioni nervose dopaminergiche.
• L'espressione è più elevata nella substantia nigra (PubMed:7637582) e nello striato (PubMed:17296554), regioni cerebrali fondamentali per il controllo motorio e l'elaborazione della ricompensa; l'espressione della proteina è stata confermata nelle varicosità assonali (PubMed:17296554). Riferimenti correlati: PMID:7637582 PMID:17296554
• La proteina appartiene alla famiglia dei trasportatori di neurotrasmettitori solute carrier 6 (SLC6) e contiene dodici eliche transmembrana, che formano i siti di legame del substrato e degli ioni.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione N-linked e i ponti disolfuro, fondamentali per il ripiegamento del trasportatore e il suo indirizzamento alla membrana plasmatica.
• Le variazioni genetiche di SLC6A3 sono associate a disturbi neurologici, tra cui parkinsonismo e distonia, come evidenziato dalle parole chiave correlate alle patologie.
• Oltre al trasporto della dopamina, DAT è stato implicato nella regressione dei vasi ialoidei retinici dipendente dalla luce nei modelli animali, indicando potenziali funzioni non neuronali (per similarità).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio intracellulare N-terminale (aa 1-100); per le applicazioni di immunofluorescenza (IF) e immunoistochimica (IHC), si raccomanda la permeabilizzazione per garantire l'accesso dell'anticorpo.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda a circa 68 kDa; includere controlli positivi e negativi appropriati per confermare la specificità.
• Nelle applicazioni IHC su paraffina (IHC-P) e IF su paraffina (IF-P), il recupero antigenico mediante tampone citrato con trattamento termico può migliorare il rilevamento; eseguire il test su sezioni di tessuto cerebrale note per esprimere DAT.
• Per l'ELISA, l'anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; ottimizzare le concentrazioni di rivestimento e le condizioni di blocco per ottenere il miglior rapporto segnale/rumore.
• È stata osservata una reattività crociata con topo e ratto; tuttavia, nell'interpretazione dei risultati è necessario considerare l'allineamento delle sequenze tra le specie nella regione dell'immunogeno.

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