Anticorpo Policlonale Anti-DPPA3/Stella per WB e ELISA - Q8QZY3

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Stella

• DPPA3, noto anche come Stella, PGC7 o proteina 3 associata alla pluripotenza dello sviluppo, è una proteina specifica delle cellule germinali primordiali (PGC) fondamentale per lo sviluppo embrionale precoce.
• Svolge un ruolo centrale nella riprogrammazione epigenetica durante la fecondazione: protegge specificamente il pronucleo materno e alcuni loci imprintati paterni dall'ossidazione di 5mC a 5hmC mediata da TET3, preservando così i pattern di metilazione del DNA.
• Stella riconosce e lega l'istone H3 dimetilato alla lisina 9 (H3K9me2) sul genoma materno; questo marcatore è abbondante nel pronucleo materno ma non in quello paterno, che è in gran parte impacchettato con protamine.
• La proteina è anche coinvolta nella condensazione della cromatina durante l'oogenesi e può contribuire al mantenimento degli stati totipotenti/pluripotenti durante lo sviluppo preimpianto.
• Subcellolarmente, DPPA3 si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, coerentemente con i suoi ruoli nell'interazione con la cromatina e nei processi citoplasmatici.
• L'espressione tissutale è limitata alle cellule germinali e agli embrioni precoci: viene rilevata in ovociti immaturi, ovociti in maturazione, embrioni preimpianto, blastocisti, epiblasti e cellule germinali primordiali; l'espressione si perde nelle cellule somatiche differenziate e nei testicoli adulti.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina di fusione ricombinante che comprende gli amminoacidi 1–150 di Stella umana, il che suggerisce che l'anticorpo possa bersagliare epitopi all'interno di questa regione N-terminale. La reattività crociata con topo e ratto implica sequenze conservate; convalidare la specificità nella specie di vostro interesse.
• Per il Western blotting, dovrebbe essere rilevata una banda attesa a circa 18 kDa in campioni di ovociti di topo, embrioni precoci o linee di cellule germinali. A causa dell'espressione limitata, si raccomanda particolare attenzione alla preparazione dei campioni e ai controlli di caricamento.
• Nell'ELISA, valutare l'utilizzo dell'anticorpo per la rilevazione o la cattura in saggi che richiedono il riconoscimento di Stella. Le concentrazioni di lavoro ottimali devono essere determinate sperimentalmente per ogni applicazione.
• Come per ogni anticorpo policlonale, possono verificarsi variazioni da lotto a lotto; l'inclusione di controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio, tessuti knockout per Stella) può aumentare la fiducia nei risultati.

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