Anticorpo policlonale di coniglio anti-DR5/TRAILR2/TNFRSF10B per WB ed ELISA - O14763

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di DR5/TRAILR2/TNFRSF10B

• DR5/TRAILR2/TNFRSF10B è un membro della superfamiglia dei recettori del fattore di necrosi tumorale, noto anche come recettore della morte 5 (DR5), KILLER e TRAIL-R2. È codificato dal gene TNFRSF10B sul cromosoma 8p21.3.
• Il recettore si lega al ligando citotossico TNFSF10/TRAIL, innescando l'apoptosi attraverso il reclutamento dell'adattatore FADD e della caspasi-8 per formare il complesso di segnalazione che induce la morte (DISC). Riferimenti correlati: PMID:10549288
• Dopo la formazione del DISC, la caspasi-8 viene attivata proteoliticamente, avviando una cascata di caspasi che esegue l'apoptosi. La segnalazione mediata da DR5 attiva anche NF-kB, collegandola alle vie di sopravvivenza.
• DR5 è essenziale per l'apoptosi indotta dallo stress del reticolo endoplasmatico, evidenziando il suo ruolo nelle risposte allo stress cellulare.
• La proteina è una glicoproteina transmembrana di tipo I localizzata nella membrana plasmatica. Contiene caratteristici domini extracellulari ricchi di cisteina e un dominio di morte citoplasmatico.
• DR5 è ampiamente espresso nei tessuti adulti e fetali, con un'espressione particolarmente elevata nelle linee cellulari tumorali (ad es. HeLa, K-562, HL-60, SW480, A-549, G-361) e nel cuore, fegato, pancreas, milza, timo, prostata, ovaio, utero, placenta e tratto intestinale; non è rilevabile nel cervello.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme e la proteina subisce modificazioni post-traduzionali, tra cui glicosilazione e formazione di ponti disolfuro, fondamentali per la stabilità del recettore e il legame al ligando.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo policlonale corrisponde agli amminoacidi 260-440 di DR5/TRAILR2/TNFRSF10B umano, comprendendo il dominio di morte intracellulare e parte della regione citoplasmatica. Questo design può essere adatto per rilevare sia le forme complete sia quelle clivate del recettore.
• Data la specificità per DR5 umano, gli sperimentatori dovrebbero validare la reattività crociata in caso di utilizzo di campioni non umani; la reattività del prodotto verso l'uomo è confermata.
• Per il Western blot (WB), le linee cellulari con elevata espressione di DR5 (ad es. HeLa, K-562, SW480) possono fungere da controlli positivi, mentre i tessuti cerebrali possono risultare negativi. Si consiglia di utilizzare condizioni di lisi e riduzione appropriate per osservare la banda di circa 48 kDa.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e del sistema di rilevazione a causa della localizzazione del recettore nella membrana; come bersagli di cattura si possono valutare la proteina DR5 ricombinante o i lisati cellulari.
• Poiché DR5 è soggetto a splicing alternativo e glicosilazione, in alcuni campioni possono essere osservate bande multiple o uno striscio. L'uso di enzimi di deglicosilazione o la conferma mediante knockdown con siRNA può contribuire a validare l'identità della banda.

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