Anticorpo policlonale di coniglio Anti-DSG3/Desmogleina-3 per IHC-P, ELISA - P32926

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Desmogleina-3

• La Desmogleina-3 (DSG3), nota anche come antigeno del pemfigo volgare da 130 kDa (PVA) e membro della famiglia delle caderine 6 (CDHF6), è una glicoproteina transmembrana legante il calcio della superfamiglia delle caderine, coinvolta principalmente nell'adesione cellulo-cellulare mediata dai desmosomi.

• La DSG3 è un componente centrale delle giunzioni cellulo-cellulari dei desmosomi ed è necessaria per la regolazione positiva dell'adesione cellulare e per l'assemblaggio delle giunzioni aderenti e desmosomiche in risposta alla forza meccanica nei cheratinociti. Riferimenti correlati: PMID:31835537

• Essenziale per l'adesione cellulo-cellulare mediata dai desmosomi delle cellule che circondano il bulbo del pelo in telogen e lo strato basale dell'epitelio della guaina esterna del follicolo, ancorando quindi i peli in telogen all'interno del follicolo pilifero. Riferimenti correlati: PMID:9701552

• Necessaria per il mantenimento della barriera epiteliale promuovendo l'attacco intercellulare mediato dai desmosomi dell'epitelio suprabasale alle cellule basali (per similarità).

• Svolge un ruolo nella stabilizzazione dei livelli proteici delle componenti della placca desmosomica DSP, JUP, PKP1, PKP2 e PKP3. Riferimenti correlati: PMID:22294297

• Coinvolta nella meccano-trasduzione: necessaria per la localizzazione di YAP1 sulla membrana plasmatica nei cheratinociti in risposta alla sollecitazione meccanica tramite un complesso con PKP1 e YWHAG, e regola positivamente la trascrizione dei geni bersaglio di YAP1 e la proliferazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:31835537

• Regola positivamente la contrattilità cellulare e la formazione delle giunzioni cellulari tramite l'organizzazione dei fasci di F-actina corticale e l'ancoraggio dell'actina alle giunzioni strette, in collaborazione con RAC1. Riferimenti correlati: PMID:22796473

• La frazione citoplasmatica di DSG3 è necessaria per la localizzazione di CDH1 e CTNNB1 sulle giunzioni aderenti in via di sviluppo, potenzialmente tramite la modulazione dell'attività di SRC; inibisce inoltre la migrazione dei cheratinociti sopprimendo la segnalazione di p38MAPK, regolando la guarigione delle ferite. Riferimenti correlati: PMID:22294297 PMID:26763450

• Subcellularmente, la DSG3 si localizza sulla membrana cellulare, nei desmosomi, nelle giunzioni strette e nel citoplasma. È espressa negli strati basale e spinoso dell'epidermide, nella pelle, nella mucosa, nella mucosa esofagea, nella guaina esterna del follicolo pilifero, nella lingua e nelle tonsille.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 50–615 della DSG3 umana, includendo i domini extracellulari ripetuti delle caderine; questo progetto può favorire il riconoscimento specifico delle conformazioni native della proteina.
• Per IHC-P è possibile applicare protocolli standard di recupero dell'antigene (ad esempio, recupero epitopico indotto dal calore in tampone citrato, pH 6,0); includere sempre controlli tissutali positivi e negativi appropriati.
• Per ELISA, la proteina immunogena ricombinante può essere utilizzata come strumento per l'ottimizzazione del test e come controllo positivo; eseguire la titolazione dell'endpoint per determinare la diluizione ottimale dell'anticorpo.
• Questo anticorpo reagisce con la DSG3 umana; la reattività crociata con altri membri della famiglia delle desmogleine o delle caderine non è stata completamente caratterizzata: si raccomanda una validazione indipendente per pannelli multiplex.
• Il peso molecolare predetto della DSG3 è di circa 108 kDa; se l'anticorpo viene adattato per Western blotting (attualmente non validato), si consiglia di utilizzare gel a bassa percentuale e tempi di trasferimento prolungati.

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