Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Dynein intermediate chain 1 per WB, ELISA - Q9UI46

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Catena Intermedia 1 della Dineina

• Il gene DNAI1 codifica per la catena intermedia 1 assonemica della dineina, una proteina contenente ripetizioni WD che funge da componente strutturale e funzionale critica del complesso del braccio esterno della dineina nei cigli mobili e nei flagelli.
• Questa proteina è essenziale per il movimento ciliare lungo i microtubuli, generando la forza necessaria per la clearance mucociliare nel tratto respiratorio e per la motilità degli spermatozoi.
• Multiple isoforme proteiche sono prodotte attraverso splicing alternativo, il che può contribuire alla regolazione specifica per tessuto dell'assemblaggio e della funzione della dineina in diversi tipi di cellule cigliate.
• A livello proteico, DNAI1 è espressa prevalentemente nelle cellule epiteliali cigliate respiratorie, in linea con il suo ruolo nel proteggere le vie aeree dall'accumulo di patogeni e particelle.
• Subcellularmente, DNAI1 si localizza lungo l'intero assonema dei cigli e dei flagelli, ancorata ai microtubuli doppietti esterni come parte del complesso motore della dineina.
• Le mutazioni in DNAI1 sono associate alla discinesia ciliare primaria (PCD) e alla sindrome di Kartagener, disturbi caratterizzati da infezioni respiratorie croniche, situs inversus e infertilità maschile dovuta a cigli e spermatozoi immobili.
• Le modificazioni post‑traduzionali, in particolare la fosforilazione, regolano l'attività della dineina e la dinamica assonemica, sebbene i siti di modificazione precisi su DNAI1 debbano ancora essere completamente mappati.
• La regione N‑terminale contiene domini a ripetizione WD40 che mediano le interazioni proteina‑proteina essenziali per l'integrità del complesso della dineina e la generazione della forza motrice.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il rilevamento in Western blot, preparare lisati da linee cellulari o tessuti epiteliali cigliati per confermare l'espressione endogena; ci si aspetta una banda intorno a 79 kDa.
• Utilizzare condizioni standard di SDS‑PAGE (es. gel all'8–10%) e ottimizzare il trasferimento per proteine ad alto peso molecolare per garantire un rilevamento efficiente.
• Poiché l'immunogeno comprende gli amminoacidi N‑terminali 1–200, l'anticorpo potrebbe riconoscere multiple isoforme; convalidare la specificità utilizzando controlli di knockdown o knockout se disponibili.
• Per applicazioni ELISA, rivestire la piastra con l'immunogeno ricombinante o la proteina purificata e titolare l'anticorpo per stabilire una concentrazione di lavoro adeguata.
• Poiché è riportata reattività crociata con topo e ratto, questo anticorpo può essere considerato per studi in queste specie, ma si consiglia un'opportuna ottimizzazione del protocollo specifica per specie.

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