Anticorpo policlonale coniglio anti-EDEM2 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9BV94

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di EDEM2

• EDEM2 (C20orf31, C20orf49, bA4204.1) è una proteina 2 simile all'alfa-mannosidasi che potenzia la degradazione del reticolo endoplasmatico.
• Gioca un ruolo chiave nella via di degradazione associata al reticolo endoplasmatico (ERAD), riconoscendo e indirizzando le glicoproteine mal ripiegate per la degradazione proteasomica in modo dipendente dagli N-glicani. Riferimenti correlati: PMID:15537790 PMID:25092655
• Si propone che EDEM2 avvii l'ERAD catalizzando il primo passaggio di trimmaggio del mannosio dei glicani substrato, convertendo Man9GlcNAc2 in Man8GlcNAc2. Riferimenti correlati: PMID:25092655
• Probabilmente si lega a patch idrofobe esposte sulle proteine mal ripiegate, facilitando la loro retrotraslocazione e degradazione.
• La proteina localizza nel lume del reticolo endoplasmatico.
• EDEM2 è espresso ubiquitariamente nei tessuti umani, con l'espressione più forte nell'intestino tenue e nei leucociti del sangue periferico e la più bassa nel cervello e nel muscolo scheletrico.
• È soggetto a splicing alternativo e partecipa alla risposta alla proteina srotolata.
• Il peso molecolare previsto di EDEM2 umano è di circa 65 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato prodotto contro un frammento ricombinante che copre gli amminoacidi 399–578 di EDEM2 umano, una regione che può conferire specificità per il bersaglio; si consiglia di verificare con i propri controlli.
• Per il Western blot, è prevista una banda intorno a 65 kDa; l'utilizzo di linee cellulari come HeLa o HEK293 come controlli positivi è consigliabile, ma si raccomanda la validazione nel proprio sistema di campioni specifico.
• Nell'immunocitochimica (IF/ICC), le condizioni di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzate per le proteine del lume del RE; i test iniziali con cellule note per esprimere EDEM2 possono aiutare a stabilire il protocollo.
• Le applicazioni ELISA possono essere sviluppate utilizzando la proteina EDEM2 ricombinante o saggi basati su cellule; titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.
• L'anticorpo cross-reagisce con EDEM2 murino, supportando il suo utilizzo negli studi su modelli murini; tuttavia, confermare sempre la reattività con appropriati lisati di tessuto murino.
• Essendo un anticorpo policlonale, può verificarsi variabilità lotto-per-lotto; includere controlli positivi e negativi in ogni esperimento.

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