Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-EEA1 per WB, ELISA - Q15075

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Antigene 1 dell'Endosoma Precoce

• L'antigene 1 dell'endosoma precoce (EEA1), noto anche come proteina associata all'endosoma p162 o proteina 2 contenente il dominio dito di zinco FYVE (ZFYVE2), è una proteina periferica di membrana coinvolta nel traffico endosomiale.
• EEA1 si lega specificamente alle vescicole fosfolipidiche arricchite di fosfatidilinositolo 3-fosfato (PtdIns(3)P), facilitando la fusione e il traffico degli endosomi precoci.
• La proteina contiene un dominio dito di zinco FYVE C-terminale che la indirizza alle membrane degli endosomi precoci, insieme a domini a elica avvolta estesi che mediano la dimerizzazione e l'interazione con altri regolatori endocitici.
• È localizzato prevalentemente sulla faccia citoplasmatica delle membrane degli endosomi precoci, ma può essere rilevato anche nel citosol.
• Studi funzionali mostrano che EEA1 partecipa all'ancoraggio e alla fusione endosomiale dipendenti da Rab5, essenziali per il corretto progresso della via endocitica.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione, e caratteristiche strutturali come motivi a elica avvolta e il motivo di legame della calmodulina IQ contribuiscono ai suoi ruoli regolatori.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente alla regione N-terminale (aa 1-100) di EEA1 umano, che è altamente conservata nel topo e nel ratto, supportando la reattività crociata osservata.
• Per l'analisi Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 162 kDa; considerare l'uso di un gel SDS-PAGE al 6-8% e condizioni riducenti standard.
• L'anticorpo è stato validato dal fornitore per WB e ELISA; per altre applicazioni come l'immunofluorescenza o l'immunoprecipitazione, si consiglia l'ottimizzazione.
• Poiché EEA1 è associato alla membrana, considerare l'inclusione di detergenti delicati nei tamponi di lisi per migliorare la solubilità dell'antigene e il rilevamento.
• Validare la specificità dell'anticorpo nella specie target (umano, topo, ratto) con appropriati controlli positivi e negativi.

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