Anticorpo policlonale di coniglio anti-EEA1 per WB, IHC-P, ELISA - Q15075

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di EEA1

• EEA1 (antigene 1 dell'endosoma precoce), noto anche come proteina p162 associata all'endosoma o ZFYVE2, è una proteina di circa 162 kDa codificata dal gene EEA1 nell'uomo.
• Funziona come fattore di tethering legandosi al fosfatidilinositolo 3-fosfato (PtdIns(3)P) sulle membrane endosomiali, facilitando l'aggancio e la fusione delle vescicole durante il traffico degli endosomi precoci.
• La proteina è localizzata prevalentemente sulla superficie citoplasmatica delle membrane degli endosomi precoci ed è presente anche nel citosol, in linea con il suo ruolo nella dinamica di membrana.
• EEA1 contiene un dito di zinco C2H2 N-terminale, estesi domini coiled-coil e un dominio C-terminale a dito di zinco FYVE che media direttamente il legame con PtdIns(3)P.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione e la proteina è soggetta a identificazione proteomica, indicando un'ampia espressione nei tessuti.
• Parole chiave: Struttura 3D, Coiled-coil, Citoplasma, Sequenziamento diretto delle proteine, Endosoma, Membrana, Legame ai metalli, Fosfoproteina, Identificazione proteomica, Proteoma di riferimento, Zinco, Dito di zinco.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 1182–1411 di EEA1 umano, coprendo la regione C-terminale che include il dominio FYVE. Ciò può contribuire al riconoscimento specifico della proteina a lunghezza completa.
• Per il Western blot, è prevista una banda principale intorno a 162 kDa. Utilizzare gel SDS-PAGE a bassa percentuale e tempi di trasferimento prolungati per migliorare il rilevamento di questo bersaglio ad alto peso molecolare.
• Negli esperimenti di IHC-P, le condizioni di recupero antigenico devono essere ottimizzate per ciascun tipo di tessuto e si raccomanda l'uso di controlli positivi e negativi appropriati.
• Per le applicazioni ELISA, prendere in considerazione l'uso dell'anticorpo come reagente di cattura o di rilevamento dopo la validazione con EEA1 ricombinante o lisati cellulari.

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