Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-eEF2 (EF-2) per WB, ELISA - P13639

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di eEF2

• Il fattore di allungamento 2 (eEF2) catalizza la traslocazione ribosomiale dipendente da GTP durante l'elongazione della traduzione, spostando il peptidil-tRNA dal sito A al sito P e il tRNA deacilato dal sito P al sito E (PubMed:26593721) Riferimenti correlati: PMID:26593721
• Questa traslocazione è accoppiata al movimento dell'mRNA e a cambiamenti conformazionali nel ribosoma per guidare la transizione dallo stato pre- a quello post-traslocazionale (PubMed:26593721) Riferimenti correlati: PMID:26593721
• eEF2 appartiene alla superfamiglia delle GTPasi fattore di traduzione di classe TRAFAC, contenente domini di legame e idrolisi del GTP essenziali per la sua funzione
• Si localizza prevalentemente nel citoplasma ma può essere trovato anche nel nucleo
• Subisce estese modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione, ADP-ribosilazione, metilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che possono regolarne l'attività
• Le mutazioni in EEF2 sono associate all'atassia spinocerebellare 26 (SCA26), un disturbo neurodegenerativo
• La proteina ha un peso molecolare calcolato di ~95.3 kDa, coerente con la migrazione osservata a ~95 kDa in SDS-PAGE

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1–290) di eEF2 umano, il che può consentire il rilevamento delle forme a lunghezza intera e di alcune forme troncate
• Per il western blot, la banda prevista è di ~95 kDa; validare con appropriati controlli positivi e negativi
• A causa del ruolo essenziale di eEF2 nella traduzione, i livelli di espressione possono variare con le condizioni di crescita cellulare; considerare l'uso di controlli di caricamento come β-actina o GAPDH
• L'ELISA può essere utilizzato per il rilevamento quantitativo; determinare empiricamente la diluizione ottimale dell'anticorpo e l'intervallo lineare del saggio
• Per l'immunofluorescenza o l'IHC, notare che eEF2 è principalmente citoplasmatico ma può anche mostrare colorazione nucleare; utilizzare protocolli appropriati di fissazione e permeabilizzazione

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