Anticorpo policlonale di coniglio Anti-eEF2 per WB e ELISA - P13639

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di eEF2

• eEF2 (fattore di elongazione 2) è una GTPasi chiave che guida la traslocazione ribosomiale durante l'elongazione della sintesi proteica. Riferimenti correlati: PMID:26593721
• Catalizza il movimento coordinato delle molecole di tRNA e mRNA attraverso il ribosoma, passando dallo stato pre-traslocazionale a quello post-traslocazionale.
• eEF2 è codificato dal gene EEF2 e le sue mutazioni sono collegate alla atassia spinocerebellare di tipo 26 (SCA26), una malattia neurodegenerativa.
• La proteina è prevalentemente citoplasmatica, ma può anche localizzarsi nel nucleo, suggerendo possibili funzioni extra-ribosomali.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione, ADP-ribosilazione, metilazione e ubiquitinazione, che regolano la sua attività.
• È un membro della famiglia dei fattori di elongazione leganti il GTP e un componente essenziale del macchinario della biosintesi proteica.
• Il suo peso molecolare è di circa 95 kDa (previsto 95.338 Da dalla sequenza).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1–290) di eEF2 umano; tenere in considerazione questa regione per la mappatura dell'epitopo o nei saggi competitivi.
• Per Western blot, utilizzare lisati cellulari o tissutali integrali; eEF2 è abbondante, quindi un caricamento standard (es. 20–30 µg) può essere sufficiente. Ottimizzare il blocco e la diluizione dell'anticorpo per il proprio sistema sperimentale.
• In ELISA, rivestire la piastra con eEF2 ricombinante o peptidi ed eseguire la titolazione a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali di rivestimento e di anticorpo.
• Validare la reattività crociata con campioni umani; la reattività con altre specie non è stata testata, quindi verificare empiricamente se si utilizzano campioni non umani.
• Poiché eEF2 è soggetto a multiple modifiche post-traduzionali, in determinate condizioni possono apparire shifts di banda o bande multiple; per identificare le forme modificate si può utilizzare la defosforilazione o inibitori specifici.

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