Anticorpo policlonale coniglio Anti-EFNA1 per WB, IHC-P, ELISA - P20827

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di EFNA1

• EFNA1 codifica per l'efrina-A1, un ligando ancorato alla superficie cellulare tramite glicosilfosfatidilinositolo (GPI) della famiglia delle tirosin-chinasi recettoriali Eph. È anche noto come LERK-1, B61 e proteina 4 indotta dal TNF alfa.
• L'efrina-A1 si lega in modo promiscuo ai recettori Eph sulle cellule adiacenti, mediando la segnalazione bidirezionale dipendente dal contatto che regola la migrazione cellulare, la repulsione e l'adesione durante lo sviluppo neuronale, vascolare ed epiteliale. Riferimenti correlati: PMID:17332925 PMID:18794797
• Nella biologia vascolare, l'efrina-A1 svolge un ruolo fondamentale nell'angiogenesi attivando EPHA2 per promuovere la differenziazione e la migrazione delle cellule endoteliali.
• Come ligando per EPHA3, l'efrina-A1 inibisce la transizione epitelio-mesenchimale nelle cellule cardiache, contribuendo al corretto sviluppo del cuore. Riferimenti correlati: PMID:12794130
• L'efrina-A1 può anche partecipare alla morfogenesi delle spine dendritiche (per similarità).
• La proteina si localizza prevalentemente sulla membrana cellulare tramite un ancoraggio GPI, ma può essere rilasciata in forma solubile mediante scissione. È espressa in abbondanza nel cervello e la sua espressione è spesso downregolata nel glioma primario. L'efrina-A1 monomerica solubile è stata rilevata nel glioblastoma e nelle cellule del cancro al seno.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la formazione di legami disolfuro e la glicosilazione N-linked. La proteina subisce splicing alternativo, generando isoforme legate alla membrana e isoforme secrete.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 19-182 di EFNA1 umano, e copre il dominio extracellulare di legame al recettore. L'anticorpo policlonale ottenuto può riconoscere sia le isoforme full-length ancorate al GPI sia le isoforme solubili.
• Per il Western blot, è consigliabile testare diluizioni dell'anticorpo nell'intervallo comunemente utilizzato per gli anticorpi policlonali (ad es. 1:500–1:2000) e confermare la specificità utilizzando lisati di linee cellulari con sovraespressione e silenziamento di EFNA1. L'EFNA1 endogeno migra a circa 24 kDa.
• Per IHC-P, considerare l'ottimizzazione del recupero dell'antigene e includere controlli tissutali appropriati. Possono essere utilizzate sezioni di tessuto paraffinate sia umane che murine, data la reattività crociata dichiarata.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; la concentrazione di lavoro ottimale deve essere determinata sperimentalmente nel formato di saggio specifico.
• A causa della natura ancorata al GPI e della potenziale eliminazione della porzione extracellulare dell'efrina-A1, la rilevabilità può variare tra tipi cellulari e condizioni di trattamento; si consiglia la convalida nel sistema di campione pertinente.

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