Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-EGFR (Fosforo Y1068) per WB e ELISA - P00533

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di EGFR

• EGFR è una recettore tirosin-chinasi che lega i ligandi della famiglia EGF, innescando la dimerizzazione del recettore e l'autofosforilazione su residui citoplasmatici chiave, tra cui Y1068, per attivare la segnalazione a valle (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960). Riferimenti correlati: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960
• Il recettore fosforilato recluta proteine adattatrici come GRB2, portando all'attivazione di almeno quattro cascate di segnalazione principali: RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC e moduli STAT (PubMed:27153536). Riferimenti correlati: PMID:27153536
• EGFR fosforila direttamente altre proteine tra cui RGS16 e MUC1, collegando la segnalazione di EGF alla segnalazione GPCR e alle vie di adesione cellulare (PubMed:11602604, PubMed:11483589). Inoltre, può attivare la cascata di segnalazione NF-kappa-B (PubMed:11116146). Riferimenti correlati: PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:11116146
• L'interazione con CCDC88A/GIV trattiene EGFR sulla membrana cellulare, promuovendo la migrazione cellulare (PubMed:20462955). Riferimenti correlati: PMID:20462955
• Subcellularmente, EGFR è localizzato sulla membrana cellulare, nel reticolo endoplasmatico, nell'apparato di Golgi, nel nucleo, negli endosomi e può essere secrezione. Questa distribuzione dinamica supporta i suoi molteplici ruoli di segnalazione.
• È espresso ubiquitous, con l'isoforma 2 rilevata anche nei carcinomi ovarici. EGFR funziona anche come recettore ospite per l'ingresso del virus dell'epatite C (HCV) negli epatociti.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono la fosforilazione (in particolare a Y1068 dopo il legame con il ligando), la glicosilazione, l'ubiquitinazione e la palmitoilazione, essenziali per la sua attività chinasi e la durata della segnalazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico corrispondente alla regione Y1068; per la WB, assicurarti di includere inibitori di fosfatasi nei buffer di lisì per preservare la fosforilazione.
• Per l'ELISA, il rivestimento con l'antigene peptide fosforilato può aiutare a valutare la specificità dell'anticorpo; un peptide non fosforilato può servire come controllo negativo.
• Questo anticorpo ha dimostrato reattività crociata con EGFR umano e di topo, quindi può essere applicato a studi in entrambe le specie; tuttavia, si raccomanda la validazione nel sistema di campione di interesse.
• Si consiglia di utilizzare un controllo di carica che non è influenzato dallo stato di fosforilazione per normalizzare i segnali della WB.
• Dato il peso molecolare di 134 kDa, regolare adeguatamente la percentuale di gel e le condizioni di trasferimento.

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