Anticorpo Policlonale Anti-EIF1AX per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P47813

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di EIF1AX

• EIF1AX è il gene umano sul cromosoma X che codifica per il fattore di iniziazione della traduzione eucariotica 1A, noto anche come eIF-4C.
• Funziona come componente del complesso di pre-iniziazione 43S (43S PIC) che lega l'mRNA e scansiona l'UTR 5' per localizzare il codone di inizio. Insieme a EIF1, facilita la scansione dell'mRNA, il riconoscimento del codone di inizio e promuove l'assemblaggio del complesso di iniziazione 48S, dissociando anche complessi aberranti. Riferimenti correlati: PMID:9732867
• Dopo la localizzazione del codone di inizio, coopera con EIF5B per orientare il metionina-tRNA iniziatore per l'aggregazione della subunità ribosomiale 60S, formando il complesso di iniziazione 80S. La sua parte globulare risiede nel sito A della subunità 40S. Riferimenti correlati: PMID:35732735
• Viene rilasciato dal ribosoma dopo la formazione del complesso 80S, a seguito dell'idrolisi del GTP da parte di EIF5B, prima del rilascio di EIF5B. Riferimenti correlati: PMID:35732735
• L'interazione con EIF5 durante la scansione aiuta a mantenere EIF1 all'interno del 43S PIC aperto; tuttavia, a differenza degli ortóloghi del lievito, EIF1AX umano non lega direttamente EIF1. Riferimenti correlati: PMID:24319994
• Si localizza nel citoplasma, in linea con il suo ruolo nell'inizio della traduzione.
• Parole chiave includono: fattore di iniziazione, biosintesi proteica, legante RNA, legante tRNA, e interazione ospite-virus.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 10-144 di EIF1AX umano, una regione altamente conservata tra le specie; considerare di testare la reattività incrociata con altri mammiferi se necessario.
• Per il Western blot, si consiglia un gel SDS-PAGE al 15% a causa del basso peso molecolare (~16 kDa). Utilizzare controlli di caricamento appropriati e verificare la specificità della banda con campioni knockdown o knockout.
• Nell'IHC-P, potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene; ottimizzare le condizioni di fissazione e recupero per il tipo di tessuto. Includere controlli positivi e negativi.
• Per IF/ICC, la permeabilizzazione è critica per bersagli nucleari/citoplasmatici. Utilizzare Triton X-100 0,1-0,3% e validare l'anticorpo nel proprio sistema cellulare.
• È stato riportato che l'anticorpo riconosce EIF1AX in umano, topo e ratto; tuttavia, validare sempre l'anticorpo nella specie e nel contesto sperimentale rilevanti.

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