Anticorpo monoclonale di coniglio anti-eIF2α per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P05198

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di eIF2α

• eIF2α, codificato dal gene EIF2S1, è la subunità alfa del complesso del fattore di inizio della traduzione eucariotica 2 (eIF2), noto anche come eIF-2A o eIF-2alpha.
• Il complesso eIF2 forma un complesso ternario con GTP e tRNA iniziatore, si lega alla subunità ribosomiale 40S e facilita l'attacco dell'mRNA per formare il complesso di pre-inizio 43S; dopo il legame della subunità 60S, l'idrolisi del GTP produce un complesso eIF2-GDP che richiede uno scambio di nucleotidi catalizzato da eIF2B per il riciclo. Riferimenti correlati: PMID:16289705 PMID:38340717
• eIF2α è un regolatore centrale della risposta integrata allo stress (ISR): la fosforilazione da parte di chinasi sensibili allo stress (EIF2AK1/HRI, EIF2AK2/PKR, EIF2AK3/PERK e EIF2AK4/GCN2) converte eIF2α in un inibitore globale della sintesi proteica, attenuando la traduzione cap-dipendente e promuovendo la traduzione di mRNA specifici dell'ISR, come gli attivatori trascrizionali ATF4 e QRICH1. Riferimenti correlati: PMID:19131336 PMID:33384352 PMID:38340717
• In seguito a danno mitocondriale, eIF2α fosforilato si rilocalizza sulla superficie mitocondriale e attiva la mitofagia indipendente da PRKN. Riferimenti correlati: PMID:38340717
• A livello subcellulare, eIF2α si trova nel citoplasma, citosol, granuli di stress e mitocondri, in linea con i suoi ruoli nella traduzione e nella segnalazione dello stress.
• La proteina subisce acetilazione e fosforilazione, ed è classificata come fattore di inizio, fosfoproteina e proteina legante l'RNA.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aminoacidi 1–315) di eIF2α umano, che include domini critici per la formazione del complesso eIF2 e siti di fosforilazione; questo design può offrire una reattività ampia tra le specie e il riconoscimento sia delle forme fosforilate che non fosforilate.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è ~36 kDa; considera di utilizzare percentuali di gel appropriate e includi controlli rilevanti, come lisati cellulari trattati con induttori di stress (es. tapsigargina, tunicamicina), per osservare potenziali spostamenti indotti dalla fosforilazione.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC) e l'immunoistochimica (IHC-P), convalida i pattern di colorazione nel citoplasma e nei granuli di stress in condizioni normali e di stress; assicurati protocolli adeguati di permeabilizzazione e recupero dell'antigene.
• La reattività incrociata con topo e ratto suggerisce l'idoneità per modelli di roditori; tuttavia, conferma l'omologia di sequenza e convalida nel sistema sperimentale specifico.

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