Anti-eIF2A coniglio anticlerpo policlonale per WB, ELISA - Q9BY44

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'eIF2A

• eIF2A (fattore di inizio della traduzione eucariotico 2A), anche designato come fattore di inizio della traduzione eucariotico 2A da 65 kDa, è codificato dal gene EIF2A negli esseri umani. Ha un peso molecolare di circa 65 kDa (UniProt: 64990 Da).
• eIF2A funziona nelle prime fasi della sintesi proteica per un sottoinsieme specifico di mRNA. Dirige il legame della metionil-tRNAi alle subunità ribosomiali 40S in modo dipendente dal codone, a differenza del complesso canonico eIF-2 che opera tramite legame dipendente da GTP.
• La proteina è ampiamente espressa nei tessuti, con livelli di espressione più elevati osservati nel pancreas, cuore, cervello e placenta, indicando potenziali ruoli specifici del tessuto nella regolazione della traduzione.
• Le caratteristiche strutturali includono ripetizioni WD, che facilitano le interazioni proteina-proteina, e un dominio a bobina avvolta. eIF2A subisce splicing alternativo e modificazioni post-traduzionali come acetilazione e fosforilazione.
• È classificato tra i fattori di inizio ed è coinvolto nella regolazione della traduzione. L'identificazione proteomica ha confermato la sua presenza nei proteomi di riferimento.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico derivato dalla regione N-terminale (amminoacidi 1–100) dell'eIF2A umano. Questa regione è relativamente conservata; verificare l'identità della sequenza tra le specie se si prevede una reattività crociata con altri ortologi.
• Per il western blotting, considerare di testare le diluizioni dell'anticorpo partendo da 1:500 a 1:2000 e convalidare la specificità della banda utilizzando lisati cellulari con knockdown o knockout di eIF2A. L'eIF2A endogeno migra a ~65 kDa; assicurarsi che i marcatori di peso molecolare siano appropriati.
• Nelle applicazioni ELISA, ottimizzare le concentrazioni dell'antigene di rivestimento e dell'anticorpo. Includere controlli appropriati per tenere conto del legame di fondo dovuto alla natura policlonale dell'anticorpo.
• Dato l'ampia espressione tissutale dell'eIF2A, selezionare lisati di controllo positivo da tessuti con espressione più elevata (es. pancreas, cervello) per gli esperimenti iniziali.

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