Anticorpo monoclonale coniglio anti-EIF2AK1 per WB, ELISA - Q9BQI3

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di EIF2AK1

• EIF2AK1, noto anche come inibitore regolato dall'eme (HRI) o repressore controllato dall'eme (HCR), è una chinasi serina/treonina sensore dello stress metabolico che fosforila la subunità α del fattore di inizio della traduzione eucariotica 2 (eIF-2α) sulla serina 51. Questa fosforilazione converte l'eIF-2α in un inibitore della sintesi proteica globale, attenuando così la traduzione dipendente dal cappuccio e avviando la risposta integrata allo stress (ISR).
  Riferimenti correlati: PMID:32132706, PMID:32132707, PMID:37327776

• Come sensore dell'eme, EIF2AK1 lega l'emina attraverso un coordinamento tiolico di cisteina e azotato di istidina con affinità moderata, mantenendo la chinasi inattiva in condizioni normali. La deplezione di eme, ad esempio durante la carenza di ferro, rilascia questa inibizione, attivando l'ISR e svolgendo un ruolo cruciale nel coordinare la sintesi dell'emoglobina nei globuli rossi.

• In caso di disfunzione mitocondriale, la forma elaborata di DELE1 (S-DELE1) lega e attiva direttamente EIF2AK1, portando a una riprogrammazione trascrizionale mediata da ATF4. Questa via promuove anche la mitofagia indipendente da PRKN attraverso la fosforilazione di eIF-2α nei mitocondri danneggiati.
  Riferimenti correlati: PMID:32132706, PMID:32132707, PMID:37327776, PMID:38340717

• Il gene EIF2AK1 subisce splicing alternativo, producendo multiple isoforme proteiche. La proteina è modificata post-traduzionalmente mediante fosforilazione e coniugazione simile all'ubiquitina, come indicato da studi di fosfoproteomica e proteomica.

• La localizzazione subcellulare non è esplicitamente descritta nel record UniProt attuale; tuttavia, tutti i substrati noti e i partner funzionali si localizzano nel citoplasma, coerentemente con il suo ruolo nella regolazione della traduzione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Poiché l'immunogeno corrisponde ai residui 337-586 di EIF2AK1 umano, che comprende una grande parte del dominio chinasi, questo anticorpo è probabilmente in grado di riconoscere sia le isoforme a lunghezza intera che quelle troncate in cui questa regione è conservata. Per il Western blot (WB), considerare l'ottimizzazione della preparazione del lisato con inibitori delle fosfatasi e validare il rilevamento in linee cellulari con espressione confermata di EIF2AK1.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; l'abbinamento con un clone diverso o un anticorpo di rilevamento policlonale potrebbe migliorare la sensibilità del saggio. Validare il saggio nella matrice di campioni pertinente.
• Tenuta presente la designazione [KD Validated], l'anticorpo è stato testato in campioni di knockdown; eseguire un WB comparativo con cellule trattate con siRNA rispetto a cellule non trattate può confermare ulteriormente la specificità nel proprio sistema.

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