Anticorpo monoclonale Anti-eIF2C3 per WB, IHC-P, ELISA - Q9H9G7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di eIF2C3/Argonaute-3

• eIF2C3, noto anche come Argonaute-3 (Ago3) o fattore di iniziazione della traduzione eucariotica 2C 3, è un componente centrale del complesso di silenziamento indotto dall'RNA (RISC) coinvolto nel silenziamento genico post-trascrizionale.
• Si lega a RNA corti come i miRNA e reprime la traduzione di mRNA complementari. Nelle cellule staminali, si propone che stabilizzi siRNA derivati da ripetizioni Alu e faciliti la degradazione di un sottoinsieme di mRNA codificanti reclutando il complesso di decapping dell'mRNA tramite EDC4.
• eIF2C3 possiede attività slicer (endonucleolitica) dell'RNA ma è altamente selettivo, clivando solo RNA con sequenze flancheggianti 5′ e 3′ specifiche rispetto alla regione di complementarità guida-bersaglio (PubMed:29040713). Riferimenti correlati: PMID:29040713
• La proteina si localizza nel citoplasma ed è concentrata nei corpi P, granuli citoplasmatici coinvolti nell'immagazzinamento e nella degradazione dell'mRNA.
• eIF2C3 subisce modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione e coniugazione simil-ubiquitina, che possono regolarne la stabilità e l'attività.
• Il gene AGO3 subisce uno splicing alternativo, producendo molteplici isoforme che possono avere funzioni o pattern di espressione distinti.
• È classificato sotto diverse parole chiave funzionali: è una proteina legante l'RNA, un'endonucleasi, un'idrolasi, una proteina legante metalli e una ribonucleoproteina, sottolineando i suoi ruoli catalitici e strutturali nel silenziamento dell'RNA.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (amminoacidi 721-860) di eIF2C3 umano, che fa parte del dominio PIWI; questo dominio è fondamentale per l'attività endonucleasica e il legame dell'RNA guida. I ricercatori dovrebbero confermare che l'epitopo sia accessibile nelle loro condizioni sperimentali.
• Per il Western blotting (WB), aspettarsi una banda a circa 97 kDa. Ottimizzare la preparazione del campione con appropriate condizioni di lisi e riduzione, e includere sia controlli positivi (es. HeLa) che negativi (es. knockout) per verificare la specificità.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), considerare metodi standard di recupero dell'antigene (es. buffer citrato, pH 6.0) e validare la colorazione confrontandola con i pattern di espressione noti di eIF2C3 o utilizzando sezioni tissutali trattate con siRNA.
• Nelle applicazioni ELISA, assicurarsi un corretto coating della proteina o del peptide ricombinante e testare su un intervallo di concentrazioni di anticorpo per determinare la sensibilità e la specificità ottimali.

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