Anticorpo Policlonale Anti-eIF3B per WB, IF/ICC, ELISA - P55884

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di eIF3B

• eIF3B è una subunità centrale del fattore di inizio traduzione eucariotico 3 (complesso eIF-3), essenziale per diversi passaggi nell'inizio della sintesi proteica, inclusa la formazione del complesso pre-iniziale 43S, il reclutamento e la scansione dell'mRNA, nonché lo smontaggio e il riciclo dei complessi ribosomiali post-terminazione. Riferimenti correlati: PMID:17581632 PMID:25849773 PMID:27462815 PMID:9388245
• Il complesso eIF-3 mira e regola specificamente la traduzione di un sottoinsieme di mRNA coinvolti nella proliferazione, differenziazione e apoptosi cellulare, impiegando diverse modalità di legame con strutture ad ansa dell'RNA per attivare o reprimere la traduzione. Riferimenti correlati: PMID:25849773
• eIF3B è una proteina legante l'RNA che contribuisce al reclutamento dei fattori di inizio (eIF-1, -1A, -2:GTP:Met-tRNAi, -5) alla subunità ribosomiale 40S, facilitando la formazione del complesso pre-iniziale 43S. Riferimenti correlati: PMID:17581632 PMID:25849773 PMID:27462815
• A livello subcellulare, eIF3B si trova nel citoplasma e può localizzarsi nei granuli di stress, suggerendo ruoli nel controllo traduzionale in condizioni di stress.
• Nel contesto dell'infezione microbica, eIF3B svolge un ruolo nella traduzione del calicivirus felino (FCV) partecipando a un evento di terminazione-riinizio ribosomiale che porta alla sintesi della proteina VP2. Riferimenti correlati: PMID:18056426
• Le modificazioni post-traduzionali di eIF3B includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolarne la funzione o l'assemblaggio del complesso.
• La proteina è caratterizzata dalla presenza di ripetizioni WD, coinvolte nelle interazioni proteina-proteina, e subisce splicing alternativo, producendo isoforme.
• eIF3B è anche noto come omologo di PRT1, eIF3S9, eIF-3-eta, eIF3 p110 ed eIF3 p116. Il peso molecolare calcolato è approssimativamente 92,5 kDa, ma migra intorno a 93 kDa in SDS-PAGE.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot, ci si aspetta una banda di circa 93 kDa. Considerare l'uso di lisati cellulari totali o estratti citoplasmatici da campioni umani, di topo o di ratto, e includere controlli positivi e negativi appropriati per confermare la specificità.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), assicurare una corretta fissazione e permeabilizzazione cellulare. La colorazione è prevalentemente citoplasmatica; in condizioni di stress, eIF3B può localizzarsi nei granuli di stress, quindi considerare di indurre stress per osservare la formazione di granuli.
• Per le applicazioni ELISA, la natura policlonale e il riconoscimento di più epitopi possono aumentare la sensibilità, ma la variabilità da lotto a lotto dovrebbe essere controllata mediante standardizzazione.
• Poiché si tratta di un anticorpo policlonale di coniglio generato contro eIF3B umano, si raccomanda la validazione sul bersaglio endogeno nel sistema di campioni previsto, specialmente quando si passa da una specie all'altra (umano, topo, ratto).
• Sebbene non elencata nelle applicazioni standard, l'anticorpo potrebbe essere adatto per l'immunoprecipitazione del complesso eIF-3; tuttavia, questo deve essere testato empiricamente.

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