Anticorpo Policlonale Anti-eIF4A1 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P60842

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di eIF4A1

• Il fattore di iniziazione eucariotico 4A-I (eIF4A1) è un'elicasi dell'RNA ATP-dipendente che funge da subunità del complesso eIF4F, svolgendo un ruolo centrale nell'inizio della traduzione cap-dipendente.
  Riferimenti correlati: PMID:20156963
• eIF4A1 svolge le strutture secondarie dell'RNA all'interno della 5'-UTR degli mRNA, facilitando il legame ribosomiale e la scansione per il codone di inizio—un processo che promuove la proliferazione e la crescita cellulare.
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• Nomi alternativi includono DDX2A, EIF4A, eIF-4A, eIF4A-I ed eIF-4A-I, riflettendo la sua classificazione come elicasi dell'RNA della famiglia DEAD box.
• La proteina si trova prevalentemente nel citoplasma, inclusa la regione perinucleare, e può anche localizzarsi alla membrana cellulare e ai granuli di stress.
• eIF4A1 subisce modificazioni post-traduzionali come acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione (coniugazione Ubl), che probabilmente ne regolano la funzione e le interazioni.
• Partecipa alle interazioni ospite-virus, sottolineando il suo ruolo nei meccanismi di difesa cellulare.
• Come fattore di iniziazione chiave per la biosintesi proteica, eIF4A1 è stato identificato in numerosi studi di proteomica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre la regione N-terminale (aminoacidi 1–100). Questo design spesso produce un'alta specificità; tuttavia, la reattività incrociata con altri isoformi di eIF4A o membri della famiglia DEAD box dovrebbe essere verificata se necessario.
• Per il Western blotting, il peso molecolare atteso è di circa 46 kDa. Utilizzare lisati di controllo positivo appropriati (es. HeLa, HEK293) e validare la specificità della banda con knockdown siRNA o competizione con il peptide immunizzante.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione in base al tipo di campione. È prevista una colorazione citoplasmatica e perinucleare, ma la localizzazione nei granuli di stress può essere osservata in condizioni di stress.
• Per l'immunoprecipitazione, confermare l'efficienza eseguendo il blot con un anticorpo alternativo per eIF4A1 o mediante spettrometria di massa.
• Le prestazioni dell'ELISA possono essere valutate utilizzando proteina ricombinante o piastre rivestite con peptide; titolare l'anticorpo per ottenere rapporti segnale-rumore ottimali.

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