Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-eIF4A3 per WB, IF/ICC, ELISA - P38919

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di eIF4A3

• Codificato dal gene EIF4A3, la proteina è anche nota come RNA elicasi ATP-dipendente DDX48, proteina della matrice nucleare 265 (NMP265) e fattore di iniziazione eucariotico 4A-III.
• È un componente integrale dello spliceosoma, essenziale per lo splicing del pre-mRNA. Riferimenti correlati: PMID:11991638, PMID:22961380, PMID:28076346
• Agisce come RNA elicasi ATP-dipendente, facilitando la rimozione ATP-dipendente delle strutture secondarie dell'RNA durante lo splicing del pre-mRNA e altri processi. Riferimenti correlati: PMID:16170325
• È un componente core del complesso di giunzione dell'esone (EJC), depositato sull'mRNA in corrispondenza delle giunzioni di splicing per marcare i confini tra esoni e influenzare processi post-splicing come l'esportazione nucleare, la localizzazione subcellulare, l'efficienza della traduzione e la degradazione dell'mRNA mediata da non senso (NMD). Riferimenti correlati: PMID:16170325, PMID:16209946, PMID:16314458
• L'attività elicasi è stimolata da CASC3 e inibita dall'eterodimero MAGOH-RBM8A, che stabilizza l'EJC sull'mRNA splicato in una conformazione legata all'ATP.
• Modula lo splicing alternativo di geni apoptoticici come BCL2L1, inibendo la produzione dell'isoforma proapoptotica Bcl-X(S). Riferimenti correlati: PMID:22203037
• È coinvolto nello sviluppo craniofacciale. Riferimenti correlati: PMID:24360810
• Subcellularmente, si localizza nel nucleo, nelle speckle del nucleoplasma e nel citoplasma. È espresso ubiquitariamente e soggetto a modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 34–125 di eIF4A3 umano; pertanto, l'anticorpo riconosce probabilmente un epitopo N-terminale conservato. Si consiglia di verificare la specificità con proteina ricombinante o lisati di cellule che sovraesprimono eIF4A3.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto è di ~47 kDa. Utilizzare lisati di cellule intere da linee cellulari umane (HeLa, HEK293), di topo o di ratto come controlli positivi. Validare sempre nel proprio sistema di campionamento specifico.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, aspettarsi una colorazione nucleare (con motivo puntiforme) e eventualmente citoplasmatica. Studi di co-localizzazione con marcatori dello spliceosoma o dell'EJC possono confermare la specificità del bersaglio.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato con l'immunogeno o la proteina eIF4A3 purificata. Stabilire empiricamente le condizioni ottimali di rivestimento e rilevazione.

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