Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-eIF4EBP1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q13541

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di eIF4EBP1

• eIF4EBP1 è un repressore dell'inizio della traduzione che compete con eIF4G1/eIF4G3 per il legame con eIF4E, la proteina che lega il cappuccio dell'mRNA. L'eIF4EBP1 ipofosforilato si lega strettamente a eIF4E, impedendone l'incorporazione nel complesso eIF4F e inibendo la traduzione dipendente dal cappuccio.
• L'iperfosforilazione di eIF4EBP1 in risposta a stimoli come fattori di crescita e ormoni porta alla sua dissociazione da eIF4E, consentendo l'assemblaggio di eIF4F e l'inizio della traduzione. Questa regolazione coinvolge le vie di segnalazione MAP chinasi e mTORC1.
• Conosciuto anche come PHAS-I (proteina fosforilata stabile al calore e acida regolata dall'insulina 1), eIF4EBP1 è un mediatore chiave che collega i segnali extracellulari al controllo della sintesi proteica.
• La proteina è localizzata sia nel citoplasma che nel nucleo, in coerenza con il suo ruolo nella regolazione della traduzione e possibilmente con altre funzioni nucleari.
• eIF4EBP1 è soggetto a molteplici modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione, che regolano finemente la sua attività e stabilità.
• Come membro della famiglia delle proteine leganti eIF4E, eIF4EBP1 condivide somiglianze strutturali e funzionali con altre 4E-BP, ma presenta caratteristiche regolatorie distinte.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-100) di eIF4EBP1 umano; pertanto, l'anticorpo può riconoscere preferenzialmente frammenti full-length e N-terminali. Se si bersagliano epitopi interni in campioni fissati, prevedere un recupero dell'antigene o condizioni denaturanti per un'esposizione ottimale.
• Per Western blot, eIF4EBP1 ha un peso molecolare previsto di ~13 kDa, ma le modifiche post-traduzionali (es. fosforilazione) possono causare la presenza di più bande o shift. Validare nel sistema di campionamento pertinente e aggiungere inibitori della fosfatasi se lo stato di fosforilazione è critico.
• Per immunofluorescenza/ICC, eseguire una fissazione e permeabilizzazione adeguate per accedere alle popolazioni citoplasmatiche e nucleari. Includere controlli per confermare la specificità.
• Per ELISA, abbinare a un anticorpo di cattura o rilevamento adatto per costruire un test sandwich, tenendo conto della regione dell'epitopo lineare riconosciuto.

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