Anticorpo policlonale di coniglio anti-eIF4EBP1 per IHC-P ed ELISA - Q13541

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di eIF4EBP1

• La proteina 1 legante il fattore di inizio della traduzione eucariotica 4E (eIF4EBP1), nota anche come PHAS-I, è un repressore chiave dell'inizio della traduzione dipendente dal cap. Agisce legandosi alla subunità eIF4E e impedendone l'assemblaggio nel complesso eIF4F.
• eIF4EBP1 ipofosforilata compete con la proteina scaffold eIF4G per un sito di legame condiviso su eIF4E, inibendo così la traduzione. L'iperfosforilazione in risposta a fattori di crescita, ormoni o nutrienti dissocia eIF4EBP1 da eIF4E, consentendo la formazione del complesso eIF4F e l'inizio della traduzione.
• L'attività di eIF4EBP1 è regolata principalmente attraverso le vie di segnalazione mTORC1 e MAP chinasi, integrando segnali extracellulari e intracellulari per controllare la sintesi proteica.
• eIF4EBP1 è localizzata prevalentemente nel citoplasma, ma può essere rilevata anche nel nucleo, in accordo con il suo ruolo nella regolazione della traduzione e nel possibile trasporto di eIF4E.
• Le modifiche post-traduzionali, in particolare la fosforilazione in siti multipli, l'acetilazione e l'ubiquitinazione, modulano dinamicamente la sua affinità per eIF4E e le sue funzioni regolatorie.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato progettato contro la regione N-terminale (amminoacidi 1-118) di eIF4EBP1 umano, che comprende una regione critica per il legame a eIF4E e la regolazione dipendente dalla fosforilazione. Ciò suggerisce che l'anticorpo possa riconoscere sia le forme fosforilate sia quelle non fosforilate, ma si raccomanda la convalida nel sistema campione pertinente.
• Per applicazioni IHC-P, considerare condizioni di recupero antigenico adatte agli antigeni nucleari e citoplasmatici e includere controlli tissutali appropriati (ad es. tessuti con espressione di eIF4EBP1 notoriamente alta/bassa). La reattività crociata con topo e ratto indica una potenziale utilità in queste specie.
• Per ELISA, utilizzare la proteina eIF4EBP1 ricombinante o lisati cellulari come antigeni di rivestimento e testare le diluizioni dell'anticorpo secondo un formato a scacchiera. Poiché l'anticorpo è un pAb policlonale di coniglio, il segnale può variare tra i diversi lotti.
• In quanto anticorpo policlonale, offre un ampio riconoscimento degli epitopi, caratteristica che può essere vantaggiosa per rilevare più isoforme o modifiche, ma può anche richiedere un'attenta scelta del blocco e dell'anticorpo secondario per ridurre al minimo il background.

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