Anticorpo policlonale di coniglio Anti-EIF5 per WB, IF/ICC, ELISA - P55010

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del Fattore di iniziazione della traduzione eucariotica 5 (eIF5)

• Il fattore di iniziazione della traduzione eucariotica 5 (eIF5) è codificato dal gene EIF5 ed è un componente chiave del complesso di pre-iniziazione 43S (43S PIC) che scansiona la regione 5' non tradotta dell'mRNA per individuare il codone di inizio. Riferimenti correlati: PMID:11166181, PMID:22813744, PMID:24319994
• All'interno del 43S PIC, eIF5 agisce come proteina attivatrice della GTPasi (GAP) che stimola l'idrolisi del GTP da parte della subunità gamma di eIF2 (EIF2S3). Riferimenti correlati: PMID:11166181
• Durante la scansione, il dominio N-terminale (NTD) di eIF5 interagisce con EIF1A, mentre il suo dominio C-terminale (CTD) lega EIF1, contribuendo a mantenere EIF1 nella conformazione aperta del PIC. Riferimenti correlati: PMID:22813744, PMID:24319994
• Dopo il riconoscimento del codone di inizio, l'NTD di eIF5 innesca l'idrolisi del GTP di eIF2γ, induciendo uno stato chiuso del PIC che aumenta l'affinità del CTD per EIF2β, rilascia EIF1 e stabilizza il complesso chiuso. Riferimenti correlati: PMID:11166181, PMID:22813744
• eIF5 localizza principalmente nel citoplasma, dove avviene l'iniziazione della traduzione.
• La proteina ha un peso molecolare teorico di circa 49 kDa ed è soggetta a modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione e ubiquitinazione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per il western blotting (WB), si consiglia di utilizzare un controllo di caricamento di proteine totali e di ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario in base alla banda bersaglio di circa 49 kDa.
• Durante l'esecuzione dell'immunofluorescenza (IF/ICC), includi appropriate fasi di permeabilizzazione e blocco; convalida la specificità dell'anticorpo nella specie di interesse (uomo, topo, ratto).
• Per l'ELISA, utilizza l'immunogeno EIF5 ricombinante (amminoacidi 1-235) come controllo positivo per generare una curva standard.
• L'anticorpo è prodotto contro la regione N-terminale full-length di EIF5 umano (aa 1-235); conferma la reattività nel tuo sistema di campioni e considera la possibile reattività incrociata con altri membri della famiglia eIF5.

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